木糖发酵菌株的筛选及其特性研究

来源 :哈尔滨工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong447
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全球经济的高速发展导致以石油为代表的不可再生的各类矿物质资源日益短缺,寻找可再生性能源成为必然的趋势。燃料酒精是公认的最有发展前景的可再生清洁能源之一。以木质纤维素类生物质生产燃料酒精不仅能够降低燃料酒精生产的原料成本,同时在废物处理、环境保护等方面起到一定的作用。木糖是木质纤维素水解物中含量仅次于葡萄糖的一种单糖。木糖的有效利用是木质纤维素生物转化生产酒精的关键环节之一。因此,高糖利用率和高耐抑制物能力的木糖发酵菌种的选育一直是该领域的热门课题。本论文以微生物学的理论为基础,根据木糖发酵菌的生活环境特点,从自然环境中分离筛选出一株发酵木糖产酒精的菌株,应用菌株的生理生化特性和分子生物学手段对该菌株进行了鉴定,并根据其发酵特性对该菌株进行木糖发酵驯化,以增加其木糖发酵产酒精的能力。同时对其发酵木糖生产酒精的工艺进行了参数优化,为该菌株在纤维素燃料酒精生产工艺中的应用奠定了一定基础。其主要研究内容如下:采用以木糖为唯一碳源的YEPD平板分离法,从富含丰富的腐烂纤维素的土壤中筛选出70株木糖发酵菌株,分别在静止、好氧和厌氧条件下进行木糖发酵实验,以酒精产量为指标,根据检测结果,最终筛选出一株木糖发酵菌株,命名为FL20-2。该菌株可以同时实现木糖和葡萄糖的发酵产酒精,在厌氧条件下,发酵木糖的最大酒精产量为6.12g酒精/100g木糖,是其理论产量的13.3%。对该株菌进行形态学和生理生化学的鉴定,根据实验结果,参照《酵母菌的特征与鉴定手册》,此菌为假丝酵母属;同时FL20-2的26SrDNA鉴定结果表明,该菌株与假丝酵母属中的热带假丝酵母(Candida tropicalis)的同源性高达99%。为稳定FL20-2发酵木糖产酒精的能力,将其接入酵母木糖驯化培养基驯化培养数代,并逐步提高培养基中的初始木糖含量(2%~7%),进行底物定向刺激,使其木糖利用率提高34%;酒精产
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