随着中医药在国际地位的逐渐提高,中医药标准化成为了中医药发展的必然趋势。中药标准化主要是指质量标准化,而中药质量控制成分的遴选是中药标准化的重要组成部分,关系到中药学科的发展和国家战略问题。现行的2015年版《中国药典》中多以一种或几种指标成分含量的高低来评价中药质量的优劣,但很多成分既缺乏专属性,也没有生物活性,不能代表该中药的质量控制成分。而筛选中药质量控制成分的首要任务是评价化学成分与药效的相关性,只有找到与药效活性相关的化学成分,建立能体现药效的质量评价方法,才能从根本上控制中药的质量。近年来研究认为,药物经口服后,并不是所有成分都能发挥药效,只有最终进入血液的成分才是发挥药效的成分。随着网络信息学的发展,网络药理学成为了阐述中药治疗作用机理的新手段。因此为了提高中药质量标准,本研究以菊花、秦艽、枸杞子为例,尝试用“化学成分-入血成分-网络靶标”的模式建立一套系统、科学、可行的中药质量控制成分遴选方法。目的建立以“化学成分-入血成分-网络靶标”模式筛选中药质量控制成分的新方法。方法1.菊花、秦艽、枸杞子化学成分分析:采用HPLC法对三种中药的化学成分进行初步指认,通过与对照品进行对比,初步确定药材中已知的化学成分;再用UPLC-LTQ-Orbitrap-HRMS技术,通过一级质谱数据、二级碎片离子、对照品、参考文献和数据库来鉴定三种中药中的化学成分。2.菊花、秦艽、枸杞子多成分代谢研究:本研究以大鼠为实验对象,以三种药材的水提物为实验药物,在经过灌胃处理和肠灌流处理后,分别在腹主动脉、肠系膜静脉和股静脉采集大鼠的血液样品。血液样品离心取上清液后继续用固相萃取柱处理,在相同条件下用HPLC和UPLC-LTQ-Orbitrap-HRMS技术进行检测,找到原形入血成分,并研究药物在大鼠体内不同脏器的代谢过程及结果。3.菊花、秦艽、枸杞子质量控制成分遴选研究:利用网络药理学方法收集原形入血成分靶点和相关疾病靶点,根据拓扑参数筛选出符合条件的核心靶点,将核心靶点带入DAVID数据库进行KEGG通路分析,进一步找到与疾病相关的通路和在该通路上的重要靶点,将与这些重要靶点有相互作用关系的化合物筛选为质量控制成分,并阐明这些成分发挥治疗疾病作用的潜在药效机制。研究结果1.菊花经LC-MS分析共鉴定出54个化学成分,其中多为黄酮类成分;秦艽经LC-MS分析共鉴定出33个化学成分,其中多为环烯醚萜类成分;枸杞了水提物经LC-MS分析,共鉴定出33个化学成分,其中生物碱类、有机酸类及黄酮类化合物较多。2.经过对各血浆样品进行HPLC和LC-MS分析,并与水提物、空白样品进行对比,确定菊花中有14个原形入血成分,多为黄酮类化合物;秦艽中也有14原形入血成分,多为环烯醚萜类化合物;枸杞子中有20个原形入血成分。3.通过网络药理学分析,确定将咖啡酸、圣草酚、木犀草素、木犀草苷、芹菜素、田蓟苷、金合欢素、芹菜素-7-O-葡萄糖苷、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷、6-羟基木犀草素7-葡萄糖苷、木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷、金合欢素-7-O-葡萄糖醛酸苷,共12个原形入血成分作为菊花的质量控制成分;将龙胆苦苷、异牡荆素、淫羊藿苷和齐墩果酸,共4个原形入血成分作为秦艽的质量控制成分;将儿茶素、绿原酸、阿魏酸、芦丁和水杨酸共5个原形入血成分作为枸杞子的质量控制成分。结论本研究分别筛选了菊花、秦艽、枸杞子中的质量控制成分,并阐明了其治疗疾病的潜在药效机制。结果证明,用“化学成分-入血成分-网络靶标”的模式建立中药质量控制成分遴选的方法简便可行,可为其他中药质量控制研究提供参考。