论文部分内容阅读
本研究隶属于国家863项目子课题-《坚果活性蛋白稳定性与加工适用性研究与开发》(2013AA102206-5)。以前期实验得到的抗氧化活性最好的3-10 k Da的松子肽为研究对象,通过高效液相色谱-质谱连用鉴定出两条氨基酸序列为KCHAGP和QCHAGP的六肽。初步测定其DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率和电导率后进行L4(23)的正交试验确定高压脉冲电场技术辅助提高六肽抗氧化活性的最优参数。经最优参数处理的抗氧化肽通过圆二色谱和Zeta电位值观察六肽二级结构的变化。本研究所获结果如下:(1)通过测定DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率确定合成肽的抗氧化活性可知:合成肽KCHAGP和QCHAGP均有良好的抗氧化活性;同一条件下,合成肽KCHAGP的DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率均高于QCHAGP;两条肽的ABTS自由基清除率均优于各自的DPPH自由基清除率。测定溶液电导率确定合成肽的导电性可知:肽液的电导率与其浓度有很大关系,其浓度越大电导率越大;在相同浓度下,抗氧化肽KCHAGP的电导率要高于抗氧化肽QCHAGP。(2)以DPPH自由基清除率和ABTS自由基清除率为指标的L4(23)正交试验中,得到的最优处理条件均为:溶液浓度4 mg/m L,电场强度10 k V/cm,电场频率1800 Hz。以溶液电导率为指标的L4(23)正交试验中,得到的最优处理条件均为:溶液浓度8 mg/m L,电场强度15 k V/cm,电场频率1800 Hz。(3)通过对比未处理的抗氧化肽液以及最优参数处理后的肽液的圆二色谱和Zeta电位值,得到以下结论:不同氨基酸序列的肽在水溶液中的构象都不完全相同,抗氧化肽KCHAGP在水溶液中主要以无规则卷曲的构象分布,QCHAGP主要以β-折叠的构象分布。当肽液经过高压脉冲电场处理后,其在溶液中的构象会发生不同程度的改变。未处理的抗氧化肽KCHAGP的肽液Zeta电位值比同一条件下抗氧化肽QCHAGP的高很多,但经过高压脉冲电场处理后两者的Zeta电位绝对值差减小;经过高压脉冲电场处理后,抗氧化肽KCHAGP和QCHAGP的溶液的Zeta电位绝对值均减小。