青海地区鼠兔流感病毒感染的调查与免疫鸡群禽流感病毒混合感染的分析

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禽流感是禽流行性感冒的简称,又称真性鸡瘟,是由A型禽流感病毒中的某些亚型引起禽类(家禽和野禽)的一种从呼吸系统到严重全身性败血症的传染性疾病,鸡、火鸡、鸭和鹌鹑等家禽及野生鸟类均可感染。禽流感可在自然条件下感染人及多种动物。自1878年在意大利首次发现以来,禽流感陆续在全世界各国爆发,造成严重的经济损失。高致病性禽流感病毒被世界动物卫生组织(OIE)规定为A类传染病,引起全世界的广泛关注。据世界卫生组织(WHO)公布的数据,截止2012年2月8日,H5N1 HAPI已造成全球584人感染,345人死亡,其中中国42人感染,28人死亡。   为研究新发现的A型流感病毒的宿主—高原鼠兔的各型流感病毒感染情况,2009-2010年间分别在青海省的12个不同区域捕捉了138只鼠兔(共计107份血清样品和1104份组织样品),进行流感病毒分离和血清学调查。采用鸡胚传代接种方法,连续盲传3代,我们未能从鼠兔的组织样品中分离到流感病毒。通过血凝抑制试验,使用H1-H13禽流感标准抗原检测鼠兔血清样品中流感病毒的抗体效价,结果表明:青海湖地区H5亚型抗体阳性率为4.65%,H9亚型抗体阳性率为9.3%;青海省非青海湖地区流感病毒抗体阴性,病毒分离未见阳性。   应用RT-PCR进行检测,从送检的免疫发病鸡体内同时检测到H5N1和H9N2共感染现象,应用SPF鸡胚分离到一株H9N2亚型禽流感病毒,命名为A/chicken/Yuyao/01/2010(H9N2)。   通过全基因组测序,分析混合感染H9N2亚型病毒A/chicken/Yuyao/01/2010(H9N2)的基因组特征。氨基酸序列分析显示,HA蛋白裂解位点为PSRSSR/GL,为低致病性禽流感病毒特征,HA受体结合位点出现了人流感病毒结合位点226L,M基因出现了S31N的突变。遗传分析表明,A/chicken/Yuyao/01/2010病毒的HA基因、NA基因和NS基因在进化上属于CK/BJ/94-Like谱系,M基因和PB2基因属于G1-Like谱系,NP基因、PA基因和PB1基因属于Ck/SH/F/98-Like谱系。  
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