【摘 要】
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目前癌症的研究和治疗仍然是生物医学界的的热点和难点。然而检测肿瘤相关酶是靶向抗癌的一个切入点,本文设计了两个探针,分别检测在肿瘤细胞中高表达的两种酶:人类NAD(P)H:醌氧化还原酶同工酶-1(hNQO1)和氨肽酶N(APN)。hNQO1是一种黄素酶,通过使用内源性的NAD(P)H催化各种醌形成相应的氢醌,从而来调节细胞中的氧化还原电位水平。同时,hNQO1在在几种人类实体瘤(包括乳腺癌,前列腺癌,胰腺癌,肺癌等)中高表达(5-200倍),因此开发hNQO1敏感的探针能够检测高表达的hNQO1的癌症细胞仍
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目前癌症的研究和治疗仍然是生物医学界的的热点和难点。然而检测肿瘤相关酶是靶向抗癌的一个切入点,本文设计了两个探针,分别检测在肿瘤细胞中高表达的两种酶:人类NAD(P)H:醌氧化还原酶同工酶-1(hNQO1)和氨肽酶N(APN)。hNQO1是一种黄素酶,通过使用内源性的NAD(P)H催化各种醌形成相应的氢醌,从而来调节细胞中的氧化还原电位水平。同时,hNQO1在在几种人类实体瘤(包括乳腺癌,前列腺癌,胰腺癌,肺癌等)中高表达(5-200倍),因此开发hNQO1敏感的探针能够检测高表达的hNQO1的癌症细胞仍然具有很大应用意义。APN,又称为CD13,可从N末端位置有丙氨酸的多肽链上切割N末端的氨基酸。它广泛存在于哺乳动物体内,在人体中具有多种生理功能。值得注意的是,当尿中微球蛋白保持在正常范围内时,尿液APN能够指示肾脏非常早期的损害,可作为肾小球肾炎的早期生物标志物。研究发现APN在肿瘤细胞中上调,并且其已被证明在肿瘤侵袭、转移和血管生成中起着至关重要的作用,故APN用作癌症诊断标志物。因此检测APN的活性在APN相关疾病的诊断和病理生理学解释等方面具有重要意义。
因此本篇论文做了以下两个工作:
1.开发了一种可以高效检测体内外hNQO1酶的荧光探针NIR-hNQO1,通过实验已证明,NIR-hNQO1探针具有很低的量子产率、高灵敏度、高选择性等非常优秀的特性。且该探针可进行高对比度近红外荧光成像,并确定活细胞中hNQO1表达过量的肿瘤细胞,为hNQO1过表达相关疾病提供了巨大的诊断潜力。
2.设计了一种可以较灵敏的检测细胞内外APN酶的荧光探头,该探针通过高荧光量子产率的荧光团与L-丙氨酸通过酰胺键连接而成。该探针可被APN特异性激活,该探针在体内和模拟体内条件下都具有较高的选择性和很好的稳定性。具有良好的水溶性。由于其特别的分析性能,我们相信,该探针可作为研究和诊断APN相关疾病(包括癌症)的有前途的工具。
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