在人体内胱抑素的淀粉样突变体发生淀粉样聚集后,会引起阿尔茨海默病和脑淀粉样血管病。其原因主要由于其第68位亮氨酸残基突变为谷氨酸后形成L68Q突变体后成淀粉样纤维的能力增强有直接关系。由于鸡胱抑素(chicken Cystatin,cC)单体比较稳定,在结构上与HCC有较高的相似性,所以本文采用cC为模型来代替HCC进行研究。目前为止,3D结构域交换已经被公认为是30多种淀粉样蛋白的聚集机制,我们团队已经通过模拟证明疏水核心和AS区域在结构域交换整个过程中起着重要作用。二硫键和盐桥的形成被认为是能够影响活性蛋白的结构重排阻止形成错误折叠和聚集体。Bjork和Ylinenjarvi的研究表明,在维持蛋白的活性构象和蛋白结合能力时,cC的两个二硫键中Cys95-Cysl15相对于Cys71-Cys81比较重要,二硫键具有能够稳定蛋白的二级结构作用。因此,我们在本文中主要研究了二硫键对胱抑素单体稳定性的影响。在本研究中,我们分别研究了野生型胱抑素WT,天然突变体I66Q,新型突变体I108T中的Cys71-Cys81和Cys95-Cys115这两个二硫键对其单体稳定性的具体影响作用进行了研究。我们的数据证明Cys71-Cys81和AS区域有一个较高的结构关联性,其作用关联性要高于Cys95-Cys115二硫键。此外,断裂Cys95-Cysl 15二硫键对蛋白的解折叠过程具有更重要的作用,也可能进而影响结构域交换和二聚化的过程。更深入的分析证实发现Cys71-Cys81和Cys95-Cysl15的断裂,能够导致胱抑素及各种突变体α-螺旋的含量减少,导致单体蛋白的Helix 2被打断,因而发生AS区域的翻转。因而这可能是直接影响到了蛋白的解折叠过程。本实验研究结果为在不同的cC突变体中二硫键的形成进行深入的实验和计算机模拟学习研究提供了更深入的视野,并直接和间接的阐述了二硫键对结构域交换、聚集体和淀粉样纤维的形成影响。另外,本研究所采用的研究方法,为其它蛋白质错误折叠引起的蛋白质淀粉样聚集疾病的分子机制研究提供了一个新的思路。