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研究背景:近年来,乳腺癌发展为世界女性肿瘤第一位,占女性肿瘤发病率的24.2%。我国乳腺癌发病率明显呈上升趋势,居于首位,对女性健康造成极大威胁。乳腺癌防治需提高早期诊断比例,从而改善总体预后。循环肿瘤细胞（circulating tumor cells,CTCs）是由于各种原因从原发肿瘤灶或转移灶脱落,进入循环系统的肿瘤细胞。CTCs在血液系统中循环,而后到达目的地就像原发肿瘤上脱落的种子一样种植在远处器官,形成远处转移灶。早期乳腺癌CTCs>1个/7.5ml,晚期乳腺癌CTCs>5个/7.5ml,提示预后不良（AJCC8th Ⅱ级证据）。CTCs可进行上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）,获得更多间质特性,而间质型CTCs代表更差的肿瘤预后。金属基质蛋白酶-9（metalloproteinase-9,MMP9）是一种明胶酶,可降解细胞外基质、促进血管生成,促进肿瘤侵袭转移,协助CTCs侵袭入血,也可诱导EMT。那么,MMP9高表达是否会直接导致CTCs生成增多并且促进CTCs进行EMT?CTCs上MMP9表达与病理组织MMP9表达又是否具有相同变化趋势,还是因肿瘤异质性而有所差异?目的:本研究将对CTCs亚型及MMP9表达进行检测,探索CTCs异质性及MMP9表达与乳腺癌临床特征的关联:探讨CTCs总数及其各个亚型CTCs与临床病理的相关性;探讨MMP9表达强弱与临床病理间的相关性;探讨CTCs总体及各个亚型CTCs与MMP9表达间的关系,MMP9是否对CTCs数目及其EMT造成影响。为CTCs及MMP9表达作为早期乳腺癌补充诊断指标提供理论依据。方法:1.纳入111例确诊乳腺癌并未行手术等治疗的患者,术前清晨采集静脉血。使用CanPatrolTM二代CTC检测技术,并用RNA探针标记不同CTC亚型。术前影像学检查确定肿块大小,术后病理确定淋巴结转移情况,免疫组织化学染色检测分子分型。根据患者临床病理资料分组,使用SPSS20.0,行独立样本t检验或非参数检验比较不同临床分期、肿瘤直径、淋巴结转移、Ki-67、HER-2、分子分型组间CTCs总数及各个亚型CTCs分布的差异。2.纳入116例确诊乳腺癌并有病理片的患者,取病理片行MMP9免疫组化检查。术前影像学检查确定肿块大小,术后病理确定淋巴结转移情况,免疫组织化学染色检测分子分型。根据患者MMP9阳性强弱分组,使用SPSS20.0,行独立样本t检验、单因素方差分析、非参数检验比较不同组间患者肿瘤大小、淋巴结转移情况等临床病理信息差异。3.纳入76例确诊乳腺癌且未行手术患者,术前清晨采集静脉血检测CTCs,同时检测CTCs上MMP9表达情况,术后病理行MMP9免疫组化检查。使用SPSS20.0,行独立样本t检验或非参数检验,根据CTCs亚型、MMP9表达强弱分组,比较CTCs组间MMP9表达情况差异。结果:CTCs形成与临床分期、肿瘤直径、淋巴结转移、Ki-67呈正相关（P<0.05）;混合型CTCs数目与临床分期、肿瘤直径、Ki-67呈正相关（P<0.05）;而间质型CTCs数目随淋巴结转移增多而增多（P<0.05）。CTCs总数及各个亚型在分子分型组间差异无统计学意义（P>0.05）。MMP9高表达与淋巴结转移增多呈正相关（P<0.05）;MMP9低表达与肿瘤直径增大有关（P<0.05）。随MMP9表达升高,HER-2阳性占比先升高后降低（P<0.05）。CTCs中混合型CTCs表达MMP9阳性率较高,且混合型CTCs上MMP9中至高表达占比高于其他两种类型（P<0.05）;肿瘤组织高表达MMP9可促进CTCs生成及进行EMT（P<0.05）;肿瘤组织高表达MMP9可致表达MMP9的CTCs数目增多（P<0.05）。结论:1.CTCs存在EMT且比例较高（上皮型CTCs仅占24.28%）。临床分期较晚、肿瘤直径大、淋巴结转移多、Ki-67表达增高可导致CTCs增多;临床分期较晚、肿瘤直径大、Ki-67表达增高可导致混合型CTCs增多;而间质型CTCs数目随淋巴结转移增多而增多。CTCs总数及各个亚型在分子分型组间分布不存在明显差异。2.MMP9表达与淋巴结转移呈正相关;MMP9表达与肿瘤直径呈负相关。3.CTCs中混合型CTCs表达MMP9阳性率较高,且混合型CTCs上MMP9中至高表达占比高于上皮型和间质型两种CTC亚型;肿瘤组织高表达MMP9可促进CTCs生成及进行EMT;肿瘤组织高表达MMP9可致表达MMP9的CTCs数目增多。