嗜酸乳杆菌—地衣芽孢杆菌融合子生长特性及微胶囊化研究

来源 :山西农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:mdehuh
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嗜酸乳杆菌和地衣芽孢杆菌的融合子兼具两亲本的优良性状,益生功能进一步增强,并且易于制剂化。本研究将探讨融合子培养的适宜条件,诱导芽孢生成,并将其微胶囊化,进一步提高其肠道生存率。结果表明融合子的个体形态、菌落形态、液体培养特征均与亲本菌株存在明显差异,融合子具备了嗜酸乳杆菌的产酸能力以及地衣芽孢杆菌的芽孢生成能力。融合子在不同培养基中的生长情况CM>牛肉膏蛋白胨≈LB>MRS。CM、MRS和LB培养基的适宜初始pH分别为6、7和5,牛肉膏蛋白胨培养基中起始pH对融合子的生长繁殖影响不大。在CM培养基中,37℃更有利于融合子生长,其他培养基的最适培养温度均为35℃。除MRS培养基适合隔氧静置培养外,其余三种培养基则配以通氧摇床培养方式。固体介质对芽孢生成的诱导能力纱布>玉米芯>木屑,且随着添加量的增加而提高。添加量为0.1g/ml时,纱布、玉米芯和木屑诱导的芽孢率分别为79%、71%和63%。融合子的营养体在人工模拟胃液(simulated gastric fliud,SGF)中处理2h后存活率为0,而芽孢处理2h后的存活率为34%,说明部分芽孢在水样环境中萌发为不能耐受胃酸环境的营养体形式而失活,因此即使是芽孢形式,也有必要进行微胶囊化。融合子益生功能的发挥需要其营养体形式,在人工模拟肠液(simulated intestinal fliud, SIF)中将芽孢悬液处理6h,芽孢萌发率达82%,芽孢存在率仅为16%。将融合子进行微胶囊化处理,以包埋率为指标确定的微胶囊配方为:1%海藻酸钠、3% CaCl2、0.6%吐温-80。未经包埋的融合子,经SGF处理2 h后,数量由1.12×107下降为3.81×106,而微胶囊化的融合子1.80×106cfu·g-1下降到1.10×106cfu·g-1,存活率达到61.1%,说明胶囊在人工模拟胃液中的具有较好的稳定性,对融合子有较强的保护作用。肠溶性试验结果表明,融合子微胶囊在SIF中的活菌数在60min时由20 min时的4.33×104cfu·g-1增加为2.90×106cfu·g-1。说明被包埋的融合子在肠液中能有效释放。
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