酶法制备酪蛋白磷酸肽工艺开发

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作为一种具有多种生理功能的活性多肽,酪蛋白磷酸肽(casein phosphopeptides,CPPs)的酶法制备是近年来国内外研究的热点.目前所报道的CPPs生产工艺大多采用间歇酶促水解,反应转化率及产率均较低,产物分离纯化和酶的一次性使用都极大的增加了生产成本.此外关于扩试生产的研究也少有报道.该文在前人工作基础上,首先采用工业级胰酶间水解酪蛋白,通过最优化方法确定了胰酶—酪蛋白反应体系的最佳工艺条件,即:ph=8、T=40℃、[S]=2.0﹪、[E]:[S]1:20、t=2.5h.在间歇实验的基础上继续研究了连续反应—膜分离耦合技术,通过实验摸索得到影响连续反应—膜分离耦合工艺的关键因素,并结合生产效率确定了最佳操作条件,即:pH=8、T=40℃、V=1000mL、J=4.0mL/min、S=20g/L、E:S=1:20.利用双膜法和树脂法对所得产品进行纯化,通过与传统Ca<2+>—乙醇沉淀法比较,得出了不同纯化方法的操作条件和适用范围.同时,对不同方法所得产物进行色谱分析,并对各套纯化工艺进行了评价.最后该文在小试实验的基础上,分别进行了间歇和连续的扩试开发试验.通过自行设计和组建的扩试反应装置,不仅获得了可供工业化参考的操作参数,而且为该项目的工业化生产提供了较为充分的设计依据.
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