四株不同生境来源微生物胞外多糖的研究

来源 :中国海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kaiyuanwu
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
微生物资源的利用受到人们的广泛关注,而生存于海洋、盐碱地等特殊环境的微生物,其代谢过程受到环境的影响使其所产生的胞外多糖具有独特结构和各种活性。本文从海洋和盐碱地等环境来源的四株微生物的发酵液中提取胞外多糖,运用各种色谱分离技术得到纯品多糖,采用化学方法和现代波谱分析技术对多糖进行理化性质和结构研究,并对多糖的抗氧化活性进行测定。研究结果如下从红树林泥样来源放线菌THS-55发酵液中提取胞外多糖粗品TW,经Q-Sepharose Fast Flow阴离子交换柱层析分离得到两种多糖工WB和TWA,TWB经Sephacryl S-100凝胶柱层析纯化得到多糖TWB-A。经高效凝胶渗透色谱和PMP柱前衍生高效液相色谱分析表明,TWB-A分子量为30.8 kDa, TWB-A主要由葡萄糖组成,含有微量甘露糖,其摩尔比为]3.67:1。经红外光谱、甲基化和核磁共振波谱分析表明,TWB-A的主链部分主要由→3)Glcp(1→组成,在其C-4位存在一定分支结构,分支由Glcp(1→组成,通过体外超氧阴离子自由基、DPPH自由基和羟基自由基清除能力的评价表明,TWB-A对DPPH自由基的清除活性较高,也有一定超氧阴离子自由基和羟基自由基清除能力,其清除超氧阴离子自由基、DPPH自由基和羟基自由基的EC50值分别为4.89 mg/mL、1.79 mg/mL和6.21 mg/mL。TWB-A为结构新颖具有抗氧化活性的微生物胞外多糖,表明海洋放线菌是结构新颖的活性胞外多糖的重要来源。从滨州盐碱地来源的植物内生真菌SXH-69发酵液中提取多糖粗品HS,经Q-Sepharose Fast Flow阴离子交换柱层析和Sephacryl S-100凝胶柱层析分离纯化得到两种多糖组分HSA-M和HSC-N。高效凝胶渗透色谱分析表明,HSA-M和HSC-N的分子量分别为13.5 kDa和18.3 kDa. PMP柱前衍生高效液相色谱分析表明,HSA-M主要含有甘露糖、氨基葡萄糖、葡萄糖和半乳糖,其摩尔比为2.21:0.20:0.68:1.00; HSC-N主要含有甘露糖、葡萄糖和半乳糖且摩尔比为5.06:0.31:1.00。经红外光谱和甲基化分析表明,HSA-M中主要含有→)4)Man(1→、 →2)Glc(1→、→6)Glc(1→和→6)Man(1→连接方式,还含有少量的Glc(1→Man(1→和→2,4)Man(1→连接片段;而HSC-N中主要含有→4)Man(1→、 →6)Man(1→和→2,4)Man(1→连接方式,也含有少量的Man(1→和→2)Glc(1→。体外抗氧化活性研究表明,HSA-M对DPPH自由基和羟基自由基清除活性较高,也有一定的超氧阴离子自由基清除能力,其清除超氧阴离子自由基、DPPH自由基和羟基自由基的EC5o值分别为8.17 mg/mL、1.87 mg/mL和2.98 mg/mL。从胶州湾海藻共附生真菌2S-2发酵液中提取多糖粗品ZD,经Q-Sepharose Fast Flow阴离子交换柱层析和Sephacryl S-100凝胶柱层析分离纯化得到两种多糖组分ZDA-M和ZDB-N。高效凝胶渗透色谱分析表明,ZDA-M和ZDB-N分子量分别为3.65 kDa和3.75 kDa。PMP柱前衍生高效液相色谱分析表明,ZDA-M和ZDB-N中主要含有甘露糖和葡萄糖且摩尔比分别为1:21.9和1:28.3。红外光谱和甲基化分析表明,ZDA-M以→4)Glc(1→、末端Glc、→6)Glc(1→和→2,4)Glc(1→连接方式为主。体外抗氧化活性分析表明,ZDA-M具有DPPH自由基和羟基自由基清除活性,其清除DPPH自由基和羟基自由基的EC50值分别为2.89 mg/mL和7.54 mg/mL。从西沙海绵来源真菌Paraphaeosphaeriasp ZXM-5发酵液中提取多糖粗品ZY,经Q-Sepharose Fast Flow阴离子交换柱层析和Sephacryl S-100凝胶柱层析分离纯化得到多糖组分ZYB-A,得率为0.37g/L。经高效凝胶渗透色谱分析表明,ZYB-A的分子量为16.3 kDa。PMP柱前衍生高效液相色谱分析表明,ZYB-A主要含有甘露糖、葡萄糖和半乳糖且摩尔比为7.71:0.76:1.78。红外光谱和甲基化分析表明,ZYB-A糖链中以末端Man、→3)Gal(1→和→3)Man(1→连接方式为主,还有少量的→4)Man(1→和→6)Glc(1→另外存在少量的→3,4)Man(1→和→4,6)Man(1→,说明ZYB-A是一个多分支的葡萄半乳甘露聚糖。本论文为“海洋糖库”的建设提供了结构新颖的海洋多糖,为海洋微生物胞外多糖的研究提供依据。
其他文献
本课题研究了RSTD水溶液的热降解动力学过程。用HPLC方法测定在不同pH,不同离子强度、不同介电常数、不同浓度表面活性剂的水溶液中,在加热条件下的降解动力学过程。线性拟和的结果表明,RSTD水溶液的热降解反应为一级反应,pH_m在3左右。离子强度的增加能抑制RSTD水溶液在加热条件下的降解,介电常数的减小能抑制RSTD水溶液在加热条件下的降解。pH对RSTD水溶液影响最为明显,RSTD在酸性条件
期刊
期刊
期刊
期刊
目的:研究apelin-13通过PKC和14-3-3蛋白对大鼠VSMCs增殖和磷酸化ERK1/2的影响以及14-3-3与Raf-1之间的相互结合作用,探讨apelin-APJ系统的信号转导机制。方法:组织贴块法培养大鼠胸主动脉VSMCs;IF明确VSMCs中apelin和APJ受体的定位;WB检测14-3-3、pRaf-1、pERK1/2、ERK1/2、CyclinD1、CyclinE和Caveo
期刊
期刊