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本文以渤海海泥生境细菌TCS001为研究对象,研究其生理生化性质与系统分类地位,探讨最佳发酵条件,揭示TCS001抑菌活性、生防作用及其初步作用机理,以期为TCS001微生物农药开发利用提供实验依据。1、结合形态学、生理生化试验与gyrA分子鉴定技术,对菌株TCS001进行菌种鉴定;测定不同培养时间TCS001的OD630,绘制细菌生长曲线。结果显示TCS001为革兰氏阳性菌,系芽孢杆菌科(Bacillaceae)芽孢杆菌属贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis);TCS001适宜生长期为0-52 h,对数生长期为10-20 h。2、采用平板对峙法检测TCS001的抑菌谱,发现TCS001有广谱的抑菌活性,其对黄瓜灰霉病菌(Botrytis cinerea,BC)抑菌活性最强,为84.12±0.19%;采用单因素试验和响应面分析法对TCS001的发酵条件进行优化,优化后的最佳条件为牛肉浸膏4.0 g,转速164 rpm,温度25℃,该条件下培养得到的发酵滤液,稀释20倍后,对BC生长抑制率仍然可达89.27±2.06%。3、制备不同浓度TCS001发酵滤液,检测其对BC菌丝生长和孢子萌发的抑制作用;采用植株喷雾法,探讨TCS001发酵液对黄瓜灰霉病和黄瓜白粉病的生防效果。结果显示,TCS001发酵液对BC菌丝生长和孢子萌发均有较强的抑制作用,其中以5倍稀释液抑制作用最强,对BC菌丝生长与孢子萌发的抑制率分别为96.24±0.86%和98.05±2.67%;TCS001发酵液可显著抑制黄瓜灰霉病病斑生长,病斑抑制率为74.74±3.46%,并能显著降低黄瓜白粉病病情指数。4、通过光学显微镜和扫描电子显微镜观察TCS001对BC菌丝生长和孢子形态的影响,同时检测TCS001发酵液处理后黄瓜植株防御酶活性,初步探讨TCS001的生防机理。结果表明TCS001能导致BC出现菌丝断裂、孢子芽管膨大等现象;TCS001处理能显著提高黄瓜叶片多酚氧化酶(POD)、过氧化物酶(PPO)和苯丙氨酸解胺酶(PAL)的活性。