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目的:膀胱癌是泌尿系统最为常见的恶性肿瘤之一,也是人类癌症相关死亡的常见原因。尽管对于膀胱癌的早期诊断和治疗已经取得了一些进展,但膀胱癌的预后较差且极易复发,但仍有约50%的膀胱癌患者会发生癌症转移。目前膀胱癌发生发展的机制还有待进一步研究。因此,探讨膀胱癌的发病机制对于膀胱癌的诊断和治疗具有重要意义。非SMC凝缩蛋白I复合体H亚基（Non-SMC condensin I complex subunit H,NCAPH）是与有丝分裂密切相关的染色体凝缩蛋白。多项研究报道,NCAPH异常表达对肿瘤的发展起着重要的促进作用。例如,NCAPH能够通过促进癌细胞增殖、迁移以及抑制癌细胞周期阻滞和凋亡发挥对结肠癌的调控作用。在肝细胞癌中,NCAPH能够促进癌细胞的增殖、迁移以及侵袭。此外,NCAPH能够通过稳定染色体结构减少由Chk1/Chk2通路激活引发的DNA损伤,从而影响胰腺癌细胞的增殖、细胞周期以及凋亡。然而,NCAPH在膀胱癌中的功能作用尚未有研究报道。通过数据库我们发现NCAPH在膀胱癌中高表达,因此我们推测NCAPH可能会对膀胱癌的发展发挥调控作用。方法:1)收集30对未经放化疗膀胱尿路上皮细胞癌患者手术切除的新鲜膀胱癌组织及癌旁组织样本,提取组织内的总RNA并逆转录为cDNA,通过实时荧光定量PCR检测膀胱癌肿瘤组织和和癌旁组织中NCAPH mRNA表达水平。免疫组化检测膀胱癌肿瘤组织和和癌旁组织中NCAPH表达,对比两种组织中NCAPH表达差异;另外收集60例临床病理学资料,并分析NCAPH表达与病理特征之间的关联性。2)细胞培养:正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1以及膀胱癌细胞（UMUC-3细胞、5637细胞、SW780细胞）细胞均购自普诺赛生命科技有限公司,J82细胞购自赛百慷生物技术股份有限公司;SV-HUC-1用含10%胎牛血清的Ham’s F-12K培养基于培养箱内培养,UMUC-3和J82用含10%胎牛血清的MEM培养基于培养箱内培养,5637用含有10%胎牛血清的RPMI-1640培养基于培养箱中培养,SW780用含有10%胎牛血清的Leibovitz’s L-15培养基在37℃,5%CO2培养箱中培养;3)实时荧光定量PCR检测正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1以及4种膀胱癌细胞（UMUC-3、5637、SW780、J82）中 NCAPH 的 mRNA 表达水平;4)细胞转染:根据Real-time PCR检测结果,选择NCAPH表达水平较低的细胞SW780转染NCAPH过表达质粒,选择NCAPH表达水平较高的细胞为UMUC-3转染NCAPH siRNA;细胞分为以下两组:SW780细胞分组:A细胞:parental、vector、NCAPH OE;UMUC-3 细胞:parental、siNC、siNCAPH-1、siNCAPH-2、siNCAPH-3;利用MTT法和BrdU染色法检测敲减和过表达NCAPH对UMUC-3和SW780增殖能力的影响;5)培养膀胱癌细胞UMUC-3和SW780,转染了 NCAPH si-RNA和NCAPH过表达质粒48h后,流式细胞仪和TUENL染色法检测敲减和过表达NCAPH对膀胱癌细胞UMUC-3和SW780细胞周期分布以及细胞凋亡的影响;免疫印迹法检测细胞周期相关蛋白细胞周期蛋白B1（Cyclin B1）,细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶（Cyclin-dependent kinase 1,CDK1）,MEK1/2、phospho-MEK1/2（Ser217/221）、ERK、phospho-ERK1/2（Thr202/Tyr204）蛋白表达水平变化;6)UMUC-3 NCAPH-shRNA稳定细胞转染:UMUC-3 转染 NCAPH shRNA 和NC shRNA48h之后,细胞更换为含有500g/ml G418的完全培养基筛选稳定转染细胞,随后qRT-PCR检测各组细胞NCAPH表达水平;7)将1×106稳定转染NCAPH shRNA和NC的UMUC-3 接种至 BALB/cAnnu裸鼠右侧腋窝部位,每3天测量一次肿瘤体积,观察敲减NCAPH对膀胱癌肿瘤生长的影响;实验结果:1)实时荧光定量PCR和免疫组化结果表明NCAPH在膀胱尿路上皮细胞癌组织中表达明显高于正常膀胱组织（P<0.01）。NCAPH在4中膀胱癌细胞（UMUC-3、5637、SW780、J82）中均有表达,且表达水平明显高于正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1（P<0.0001）。在四种膀胱癌细胞中,NCAPH在UMUC-3细胞中表达最高,在SW780细胞表达水平相对较低,因此,UMUC-3和SW780细胞被用于进一步研究NCAPH功能的细胞模型;2)相关性分析结果表明NCAPH水平与膀胱癌患者性别和年龄无显著相关性（P>0.01）,与肿瘤大小、分期和淋巴结转移有关,NCAPH表达水平越高,患者肿瘤越大（P=9.5E-06）、分期越高（P=0.00382）,淋巴结转移越多（P=0.03142）,;3)实时荧光定量PCR和免疫印迹结果表明:转染NCAPH过表达质粒的SW780细胞NCAPH转录和翻译水平较对照组增加约5倍（P<0.0001）,而转染siNCAPH-1、siNCAPH-2、siNCAPH-3的UMUC-3细胞NCAPH表达水平明显降低;4)MTT和BrdU染色结果显示过表达NCAPH能明显促进膀胱癌细胞SW780增殖能力,而敲减NCAPH能抑制UMUC-3细胞增殖;5)流式细胞仪结果和TUNEL染色结果显示在SW780细胞中过表达NCAPH能明显促进细胞周期进展,抑制细胞凋亡,而敲降UMUC-3细胞中NCAPH表达后可诱导细胞周期阻滞在G2/M期,诱导细胞凋亡;6)免疫印迹结果表明在SW780细胞中,过表达NCAPH明显增加Cyclin B1、CDK1、phospho-MEK1/2（Ser217/221）、phospho-ERK1/2（Thr202/Tyr204）蛋白表达水平（P<0.001）,而转染 NCAPH siRNA 可降低 CyclinB1、CDK1 phospho-MEK1/2（Ser217/221）、phospho-ERK1/2（Thr202/Tyr204）表达水平（P<0.001）;7)体内动物实验结果表明敲减NCAPH可明显抑制肿瘤生长并减少肿瘤组织中 ki-67 表达量（P<0.01）;结论:NCAPH可能作为一种新的促癌基因参与膀胱尿路上皮细胞癌的发生发展,在膀胱尿路上皮细胞癌中呈现异常高表达,且与患者肿瘤大小、分期、分级、淋巴结转移呈正相关。NCAPH高表达可明显促进膀胱癌细胞增殖和细胞周期进展,逃避细胞凋亡性死亡,此外,NCAPH参与膀胱尿路上皮细胞癌的致癌过程可能与激活MEK/ERK通路有关。因此,NCAPH可作为膀胱尿路上皮细胞癌治疗的潜在靶点之一。