目的:利用UPLC/ESI-Q-TOF MS对苦丁茶总皂苷进行快速分析鉴定;在此基础上,结合Apo E-/-小鼠脉粥样硬化模型、RAW264.7巨噬细胞来源的泡沫细胞模型和RAW264.7巨噬细胞炎症模型,初步探讨苦丁茶总皂苷抗动脉粥样化的作用及其机制。方法:1.苦丁茶总皂苷的化学成分分析与鉴定采用70%乙醇对苦丁茶叶进行回流提取,通过大孔树脂富集总皂苷,硅胶柱色谱和半制备液相色谱分离制备单体,分析理化性质、结合波谱数据鉴定其结构。以分离得到的单体作为对照品,结合UPLC/ESI-Q-TOF MS技术,通过保留时间、分子离子峰和质谱裂解碎片分子等分析并鉴定苦丁茶总皂苷中化学成分。2.动物实验高脂饲料喂养Apo E-/-小鼠12周建立动脉粥样硬化模型,给予苦丁茶总皂苷治疗8周。8周后,剥离小鼠主动脉,对主动脉和主动脉根进行油红O染色,观察小鼠主动脉斑块形成情况及斑块厚度。酶法检测血脂水平,ELISA法检测血清中炎性因子白介素-6（IL-6）、白介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）含量。3.细胞实验（1）苦丁茶总皂苷对巨噬细胞源性泡沫细胞形成的影响利用氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导RAW264.7细胞形成泡沫细胞,油红O染色观察细胞内脂滴聚集情况,酶法检测细胞总内胆固醇（TC）含量,RT-q PCR检测清道夫受体CD36和SR-A1,ATP结合转运蛋白A1和G1（ABCA1和ABCG1）的基因表达;Western Blot法检测CD36、SR-A1、ABCA1、ABCG1、JNK、MAPK p38的蛋白表达。（3）苦丁茶总皂苷对巨噬细胞炎症的影响利用脂多糖（LPS）诱导RAW264.7细胞建立炎症,Griess法测定细胞上清液中一氧化氮（NO）的含量,ELISA检测细胞上清液中一氧化氮合酶（i NOS）、IL-6、IL-1β、MCP-1、TNF-α的含量,RT-q PCR检测细胞中i NOS、IL-6、IL-1β、MCP-1、TNF-α的m RNA表达,Wstern blot检测NF-κB p65的蛋白表达。结果:1.苦丁茶总皂苷的化学成分分析与鉴定利用柱色谱法和半制备液相色谱法从苦丁茶皂苷中分离出11个单体,利用核磁共振和质谱等波谱学方法鉴定了化合物的结构分别为苦丁茶冬青苷Q（ilekudinoside Q,化合物1）、苦丁茶冬青苷R（ilekudinoside R,化合物2）、苦丁茶冬青苷M（ilekudinoside M,化合物3）、苦丁茶皂苷D（kudinoside D,化合物4）、苦丁茶皂苷E（kudinoside E,化合物5）、苦丁茶冬青苷T（ilekudinoside T,化合物6）、苦丁茶皂苷A（kudinoside A,化合物7）、苦丁茶皂苷C（kudinoside C,化合物8）、苦丁茶皂苷F（kudinoside F,化合物9）、阔叶冬青苷G（latifoloside G,化合物10）、阔叶冬青苷H（latifoloside H,化合物11）。通过UPLC/ESI-Q-TOF MS技术对苦丁茶总皂苷中的化学成分进行鉴定,40个三萜皂苷初步被分析鉴定出来。2.动物实验高脂饮食喂养Apo E-/-小鼠12周成功建立了动脉粥样硬化模型,给予苦丁总皂苷进行治疗,与模型组相比,苦丁茶总皂苷中、高剂量组明显减少了Apo E-/-小鼠模型主动脉斑块面积,降低了血清中TC、TG、LDL-c的含量,还降低了血清中TNF-α、IL-6、IL-1β、MCP-1等炎性因子的含量。3.细胞实验（1）苦丁茶总皂苷对巨噬细胞源性泡沫细胞形成的影响利用80μg/m L ox-LDL刺激RAW264.7细胞48 h成功建立泡沫模型,评价苦丁茶总皂苷对泡沫细胞形成的影响。苦丁茶总皂苷抑制脂滴在细胞内的积累,降低了细胞内TC含量,抑制了巨噬细胞的泡沫化,显著下调了SR-A1的基因和蛋白表达,苦丁茶总皂苷高剂量显著下调了JNK、MAPK p38蛋白的表达,提示苦丁茶总皂苷可能通过下调MAPK p38、JNK等分子从而下调SR-A1的表达,抑制胆固醇吸收从而抑制泡沫细胞的形成。（2）苦丁茶总皂苷对巨噬细胞炎症的影响利用1μg/m L LPS刺激RAW264.7细胞24 h成功建立炎症模型,评价苦丁茶皂苷对巨噬细胞炎症的影响。与模型组相比,苦丁茶总皂苷中、高剂量组明显降低了细胞上清液中NO、i NSO、IL-1β、IL-6、MCP-1的含量,也明显降低了细胞中i NOS、IL-1β、IL-6、MCP-1的m RNA表达,高剂量组明显下调了NF-κB p65蛋白的表达。结论:本论文建立的UPLC/ESI-Q-TOF MS方法可对苦丁茶总皂苷中成分进行快速分析鉴定;苦丁茶总皂苷可能分别通过MAPK/JNK和NF-κB通路抑制巨噬细胞源性泡沫细胞形成及巨噬细胞炎症水平产生抗动脉粥样硬化作用。