背景:心血管疾病是全球引起死亡最常见的原因之一,炎症则机体常见的生理和病理反应,两者相关的概念已经快速地进入到临床或研究之中。诸多心血管疾病都伴有炎症反应的发生,而在这些炎症反应中,单核-巨噬细胞作为重要的炎症细胞广泛参与其中,释放出多种炎症介质进而引起相应炎症通路激活,参与心血管疾病的发生发展。沙苑子是临床常用的补肾中药,其主要有效成分黄酮类(沙苑子总黄酮)对具有降压、降脂、抗氧化、抗炎等多种药理作用。但对沙苑子总黄酮抗炎作用和机制研究尚未见深入报道。目的:应用体内转基因斑马鱼急性炎症损伤模型,体外LPS诱导RAW264.7巨噬细胞炎症反应模型,探究沙苑子主要有效成分沙苑子总黄酮对炎症反应的抑制作用及其机理,为疗效确切、安全性高的中药研究提供新的思路。方法:提取沙苑子总黄酮,使用HPLC法检测沙苑子总黄酮成分并进行质控分析;构建Tg(Cora1a:EGFP/Lyz:Ds RED)斑马鱼急性炎症损伤模型,通过斑马鱼毒性实验,确定沙苑子总黄酮对斑马鱼实验的安全浓度范围。加入沙苑子总黄酮进行干预治疗,通过观察荧光标记的巨噬细胞及中性粒细胞的迁移情况,微量法检测斑马鱼体内NO的产生情况,以及RT-PCR法检测炎症因子i NOS、TNF-α、IL-1β、IL-10等基因变化,来观察沙苑子总黄酮对Tg(Cora1a:EGFP/Lyz:Ds RED)斑马鱼急性炎症损伤的炎症抑制作用;构建LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症模型,加入沙苑子总黄酮进行干预后,通过CCK-8检测细胞活性,Griess试剂检测NO的生成,TNF-α试剂盒检测TNF-α的生成,RT-PCR检测i NOS基因表达变化,并通过Western Blot检测i NOS、NF-κB、I-κB、P38、JNK、ERK1/2的蛋白表达,以及加入NF-κB抑制剂PDTC、P38抑制剂SB203580和ERK1/2抑制剂PD98059后,NF-κB、P38、ERK1/2各自的蛋白表达情况,来探讨沙苑子总黄酮在抗炎症反应中的信号通路及分子机制。结果:沙苑子总黄酮的主要成分为沙苑子苷A和沙苑子苷B;Tg(Cora1a:EGFP/Lyz:Ds RED)斑马鱼急性炎症损伤模型中,沙苑子总黄酮在15-30μg/m L浓度范围内对斑马鱼无毒性作用,且可显著抑制急性炎症损伤后巨噬细胞及中性粒细胞的聚集迁移、NO的生成量以及i NOS炎症基因的表达,但对促炎因子TNF-α、IL-1β及抑炎因子IL-10的表达无影响;LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症模型中,沙苑子总黄酮在12.5-400μg/m L浓度范围内对巨噬细胞无毒性作用,可显著抑制炎症反应中NO、i NOS的生成,而对TNF-α无作用,Western Blot实验结果显示沙苑子总黄酮显著抑制NF-κB及I-κB的表达,并且这种抑制可被PDTC阻断,而对P38、JNK、ERK1/2的蛋白表达无明显作用。结论:沙苑子总黄酮对斑马鱼急性炎症反应及LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症反应具有炎症抑制作用,其机制可能与沙苑子总黄酮对NO生成的调控作用及抑制NF-κB/i NOS信号通路有关。