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第一部分前体蛋白酶与PKG-1在肺癌组织中的表达以及临床意义研究目的：探讨PC家族蛋白和PKG-1蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法：免疫组织化学法检测178例非小细胞肺癌患者,肿瘤组织标本以及癌旁组织标本中PC家族蛋白以及PKG-1蛋白表达水平；医学统计学分析,各因子表达水平与患者性别、年龄、病理类型、淋巴结转移、临床分期、远处转移等临床参数的相互关系。结果：1. PC-5、furin、PC-7和PKG-1在非小细胞肺癌组织中及癌旁组织中的表达：PC-7、furin在非小细胞肺癌组织中阳性表达率分别为：44.4%以及51.7%,均显著高于非小细胞肺癌癌旁组织(P<0.05)；PC-5在非小细胞肺癌中的表达(19.1%)低于癌旁组织(20.6%)(P>0.05);PKG-1在非小细胞肺癌及癌旁组织中阳性表达率分别为6.2%和57.8%(P<0.05)。2. PC-5、furin、PC-7和PKG-1与非小细胞肺癌临床病理参数的关系：PC-7、furin表达均与非小细胞肺癌分期、组织分化及淋巴结转移正相关(P<0.05),与性别、年龄无关(P>0.05)；PC-5在鳞癌表达率(22.2%)显著低于腺癌表达率(75.6%)；与淋巴结转移、临床分期负相关(P<0.05),与性别、年龄无关(P>0.05)。PKG-1与各非小细胞肺癌临床病理参数均无关(P>0.05)。结论：PC-7、furin可能在非小细胞肺癌的发生与发展中起促进作用,PKG-1与非小细胞肺癌的发展无关。第二部分非小细胞肺癌前体蛋白酶对PKG-1蛋白剪切的研究目的：通过前体蛋白酶的过表达以及抑制其活性,检测cGMP依赖性蛋白激酶的剪切水平,探讨cGMP依赖性蛋白激酶选择性剪切的分子机制。方法：构建cGMP依赖性蛋白激酶表达质粒pCDNA3-PKG-1,通过hexa-D-arginine、dec-RVKR-cmk以及al-PDX抑制前体蛋白酶活性；过表达前体蛋白酶表达的质粒；免疫印迹法检测在抑制以及过表达前体蛋白酶的条件下,cGMP依赖性蛋白激酶蛋白分子的剪切水平变化；构建不同位点,点突变的cGMP依赖性蛋白激酶分子异构体,检测前体蛋白酶对cGMP依赖性蛋白激酶剪切的蛋白靶点。通过免疫荧光法检测抑制前体蛋白酶活性后,对cGMP依赖性蛋白激酶核转位的抑制作用。结果：Western-bloting显示细胞内过表达前体蛋白酶家族成员furin, PC7能够促进细胞内cGMP依赖性蛋白激酶蛋白分子剪切,而通过dec-RVKR-cmk以及al-PDX能够抑制细胞内cGMP依赖性蛋白激酶剪切；通过不同的PKG异构体作用。可以发现前体蛋白酶对cGMP依赖性蛋白激酶的剪切位点在161位氨基酸处。抑制前体蛋白酶活性能够抑制cGMP依赖性蛋白激酶从胞浆中转位进入细胞核内。结论：前体蛋白酶能够剪切cGMP依赖性蛋白激酶分子,其剪切位点为161位氨基酸分子,前体蛋白酶对cGMP依赖性蛋白激酶分子的剪切作用是其进行核转位的必要过程。