【摘 要】
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目的肺癌是全世界癌症相关死亡的主要原因之一。SSe具有一系列药理和生化特性,包括抗肿瘤,抗炎和抗氧化活性。然而,这些特性背后的具体机制尚不清楚。本研究旨在探讨SSe在肺癌中的抗癌机制。方法用CCK-8法检测SSe处理后的肺癌A549,PC9和LLC细胞的存活率。细胞划痕实验检测不同浓度SSe（0,7,15,30μmol/L）处理后的肺癌A549和PC9细胞的迁移。流式细胞术观察了不同浓度SSe（0
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目的肺癌是全世界癌症相关死亡的主要原因之一。SSe具有一系列药理和生化特性,包括抗肿瘤,抗炎和抗氧化活性。然而,这些特性背后的具体机制尚不清楚。本研究旨在探讨SSe在肺癌中的抗癌机制。方法用CCK-8法检测SSe处理后的肺癌A549,PC9和LLC细胞的存活率。细胞划痕实验检测不同浓度SSe（0,7,15,30μmol/L）处理后的肺癌A549和PC9细胞的迁移。流式细胞术观察了不同浓度SSe（0,7,15,30μmol/L）处理后的肺癌A549,PC9和LLC细胞的凋亡。JC-1法检测了不同浓度SSe（0,7,15,30μmol/L）处理后的肺癌A549,PC9和LLC细胞的线粒体膜电位。q PCR实验检测不同浓度SSe（0,7,15,30μmol/L）和NFκB信号通路抑制剂（BAY11-7082）处理后的肺癌细胞的Bcl-2,Bax和细胞色素c以及PDK m RNA的变化水平。A549和PC9细胞经过不同浓度SSe,10μmol/LBAY11-7082和p65质粒处理后,用Western blot检测细胞中p-p65,p65,p-IκBα,IκBα,PDK,Bcl-2,Bax和细胞色素c的表达。检测经10μmol/LBAY11-7082和不同浓度SSe（0,7,15,30μmol/L）处理后的A549和PC9细胞的乳酸生成情况。免疫荧光（IHC）染色检测肺癌A549和PC9细胞经15μmol/LSSe和10μmol/LBAY11-7082处理后p65亚细胞定位的变化。采用免疫组化和HE染色检测SSe对鼠源肺癌LLC细胞体内移植瘤小鼠瘤体生长的抑制作用。Western blot检测小鼠瘤体中的p-p65,p65,p-IκBα,IκBα,PDK,Bcl-2,Bax和细胞色素c的表达。结果CCK-8,细胞划痕实验,Annexin V-FITC/PI凋亡及JC-1检测结果显示SSe对肺癌细胞生长和迁移起到抑制作用,对肺癌A549,PC9和LLC细胞的凋亡起到促进作用,并降低肺癌A549,PC9和LLC细胞的线粒体膜电位。q PCR实验结果表明SSe和BAY11-7082均能显著降低肺癌细胞Bcl-2和PDK的表达,增加Bax的表达。Western blot实验结果发现SSe和BAY11-7082均能显著降低肺癌细胞p-p65,p65,p-IκBα,IκBα,PDK和Bcl-2的表达,增加Bax和细胞色素c的表达,并抑制活化的p65从细胞质向细胞核的转位。将肺癌A549和PC9细胞进行p65的过表达,结果显示肺癌细胞Bax和细胞色素c表达减少,p-p65,p65,p-IκBα,IκBα,PDK和Bcl-2的表达增加。然而,当使用SSe进行干预以后,上述实验结果发生逆转。同时,体内研究发现SSe抑制小鼠瘤体生长。免疫组化结果显示,SSe抑制p-p65,p-IκBα,PDK和Bcl-2的表达,增加Bax的表达。Western blot检测小鼠瘤体组织中凋亡标志因子和NFκB信号通路相关蛋白的变化发现,SSe抑制p-p65,p-IκBα,PDK和Bcl-2的表达,增加Bax和细胞色素c的表达。结论本研究证明SSe通过抑制NFκB信号通路的活化,进而干扰PDK和凋亡因子的表达,抑制糖酵解,诱导肺癌细胞凋亡。这些结果突出了SSe作为临床治疗肺癌的药物的潜力。
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