【摘 要】
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高氯酸盐是一种持久性的无机污染物,在环境中不易降解,具有较高的水溶性、扩散性和稳定性。这种性质导致高氯酸盐在全球范围内广泛存在,高氯酸盐的污染问题已成为一个全球性的环境问题。代谢性疾病的发生有时可能需要双重打击,第一产生脂肪变性,第二暴露促使机体发生氧化应激。随着居民生活水平的提高,脂质摄入过量,超重和肥胖问题越来越严重。这种亚健康状态恰好满足了疾病发生的第一个条件,导致人对毒物的毒性作用更敏感。
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高氯酸盐是一种持久性的无机污染物,在环境中不易降解,具有较高的水溶性、扩散性和稳定性。这种性质导致高氯酸盐在全球范围内广泛存在,高氯酸盐的污染问题已成为一个全球性的环境问题。代谢性疾病的发生有时可能需要双重打击,第一产生脂肪变性,第二暴露促使机体发生氧化应激。随着居民生活水平的提高,脂质摄入过量,超重和肥胖问题越来越严重。这种亚健康状态恰好满足了疾病发生的第一个条件,导致人对毒物的毒性作用更敏感。许多实验报道,低剂量的高氯酸盐对正常机体没有危害,那么在高水平脂质摄入状况下呢?因此本实验结合脂质摄入过量的全球大环境,结合液质联用技术进行靶向脂质组学研究,探究在高脂饮食摄入下高氯酸盐对小鼠肝脏脂质代谢的影响。方法:（1）选用48只C57BL/6J雄性小鼠,分为4组,每组12只,喂食含有10%脂肪的高脂饲料,并分别摄入0 mg/kg、0.1 mg/kg、1 mg/kg、10 mg/kg浓度的高氯酸盐。通过比较不同组实验小鼠的体重、脏器系数,血清中AST、ALT活性,TC、TG、HDL、LDL和MDA含量,以及葡萄糖耐受情况,初步评价高氯酸盐对高脂小鼠肝脏脂质代谢的影响。（2）测定小鼠肝脏中主要脂肪代谢酶CPT-1、ACC和FAS的酶活性,测定肝脏中的脂肪酸组成及相对含量。（3）利用LC-MS/MS研究暴露于高氯酸盐环境下的高脂小鼠肝脏靶向脂质组学,经过数据处理找出有显著性变化的物质,并且对它们所在的代谢通路进行分析,从脂质组学的角度探讨高氯酸盐对高脂小鼠肝脏脂质代谢的影响。结果:（1）通过分析实验小鼠的肝脏脏器系数、油红O染色、HE染色以及血清中常规指标数据,发现暴露在0.1 mg/kg剂量高氯酸盐环境中的高脂小鼠与对照组相比无明显差别,说明0.1 mg/kg剂量高氯酸盐对小鼠脂质代谢无影响。观察血清指标以及染色切片发现,与对照组比较,摄入1 mg/kg和10 mg/kg剂量高氯酸盐的小鼠血清中TC、TG、HDL、LDL、MDA含量升高,肝脏脂质积累明显。当高氯酸盐剂量大于1 mg/kg时可对高脂小鼠肝脏造成损伤,10 mg/kg剂量高氯酸盐对小鼠健康影响更显著。（2）分析了小鼠肝脏中的脂肪酸组成及其相对含量。通过分析CPT-1、ACC和FAS三种酶的活性水平,发现高氯酸盐可能会促进脂肪的合成。随着高氯酸盐浓度的增加,C16:0、C17:0、C18:0、C20:4和C22:6水平呈现下降趋势,而C16:1、C18:1和C18:2水平呈现上升趋势。整体水平上SFA呈现下降趋势,UFA呈现上升趋势。（3）利用LC-MS/MS技术做高脂小鼠肝脏的靶向脂质组学研究。建立能同时测定PG、PC、LPC、PE、SM和TG这五类脂质的检测分析方法,并验证方法的可靠性。在检测的35种脂质代谢物中,有25种目标代谢物在三个实验组中与对照组相比存在显著性差异。分别是PG（16:0/16:0）、PG（18:2/20:3）、PG（16:0/18:2）、PG（18:0/18:1）、LPC（22:6/0:0）、LPC（20:0/0:0）、LPC（20:1/0:0）、LPC（20:4/0:0）、PC（18:1/14:1）、PC（2:0/15:1）、PC（18:0/14:0）、PC（22:1/14:0）、PC（3:0/16:0）、PC（6:0/13:1）、PC（14:0/14:0）、PE（20:3/15:0）、PE（18:0/18:2）、SM（d18:1/16:0）、SM（d18:1/19:0）、SM（d18:1/16:0）、SM（d15:3/24:0）、SM（d18:1/24:2）、TAG（54:4/FA18:1）、TAG（50:2/FA16:0）、TAG（54:4/FA18:2）、TAG（54:5/FA18:1）、TAG（54:5/FA20:4）、TAG（54:5/FA18:2）、TAG（52:5/FA18:3）、TAG（52:4/FA16:0）、TAG（52:4/FA16:1）、TAG（54:3/FA18:1）、TAG（52:2/FA16:0）、TAG（52:2/FA18:1）和TAG（52:5/FA18:1）。其中PG、TAG在三个实验组中呈上调趋势。PC、PE类物质既有上调也有下调。LPC较对照组下调。结果表明高氯酸盐主要影响了C57BL/6J高脂小鼠肝脏中的甘油磷脂代谢通路。
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