荷青花中总皂苷的提取工艺研究与单体皂苷的含量测定

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背景:荷青花(Hylomecon Japonicum(Thunb.)Prantl et kündig)是白屈菜族荷青花属的多年生早春类短命植物。在我国广泛分布,产于我国华东、东北至华中地区,多用荷青花根茎作为药用,并且应用广泛。有“散瘀消肿,舒筋活络,止痛止血,祛风湿”的功效,用于治疗跌打损伤,劳伤,四肢乏力,风湿性关节痛等病。目前文献记载从荷青花属植物中可分离提取生物碱类、萜类、酚类、黄酮类、皂苷类及其他化合物,药理活性主要体现在抗癌、抗菌、抗炎及其他方面。目的:1、对荷青花植物中单体皂苷进行含量测定,本文中单体皂苷为本实验室首次从荷青花植物中提取得到的新皂苷,命名为荷青花苷A。2、目前对于荷青花植物中的皂苷成分的提取工艺研究还很局限,现代药理学研究表明,皂苷类成分在抗癌、抗炎等方面都显现出良好的药理活性,因此,高效率地从荷青花属植物中提取皂苷成分是很有必要的。所以作者对荷青花植物中皂苷成分的提取工艺进行了研究,探索最佳提取方案。方法:1、荷青花中单体皂苷的含量测定:取荷青花干燥全草经10倍量甲醇浸泡,45℃回流提取60min,放冷过滤,重复回流3次,将所得滤液减压浓缩,得到荷青花甲醇提取物。运用HPLC检测待测样品中荷青花苷A峰面积,进行含量测定。2、荷青花中总皂苷的提取工艺研究:取荷青花干燥全草,采用单因素考察和正交试验法对乙醇浓度(%)、浸泡时间(天)、浸泡次数(次)和浸泡固液比(g/ml)进行测试。以已知荷青花苷A为对照品,采用HPLC检测待测样品中荷青花苷A的峰面积并作为检测指标,探究荷青花中总皂苷的提取工艺,得到最适宜的提取条件。结果:1、荷青花中单体皂苷(荷青花苷A)的含量为0.0227g。2、荷青花中皂苷成分的最佳提取条件如下:I:乙醇浓度为60%;II:浸泡时间为3天;III:浸泡次数为3次;IV:浸泡固液比为1/14。进一步对正交试验进行分析,计算比较得出影响提取率的主次因素,各因素的主次顺序为:I>III>IV>II。乙醇浓度对提取结果有显著影响,提取时间,提取次数和浸泡固液比对提取结果影响不显著。结论:本文对中药材荷青花中单体皂苷(荷青花苷A)进行了含量测定,并对荷青花中皂苷类成分的提取工艺进行了探讨,优化了荷青花中总皂苷的提取工艺,为进一步进行其相关成分及药理活性探索提供了研究基础,为之后荷青花植物中皂苷成分的应用研究提供相关内容的参考。
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