乙烯和类黄酮合成关系及小麦花青素糖基转移酶功能分析

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类黄酮是植物体内最重要的次生代谢物质之一,包括花青素等六大类,作为一类抗氧化剂,不仅在植物体内发挥重要功能,还有重要的保健和药用价值,比如成熟果实中花青素的富集可以提高营养价值。乙烯是一种重要的气体植物激素,作用于生命周期多种过程,尤其在光形态建成和果实成熟中发挥重要作用,而这两个过程也伴随着类黄酮的富集。有关乙烯和类黄酮间关系的研究大多集中于成熟期,萌发后光形态建成阶段两者之间关系的研究较少。另一方面,类黄酮通常发生糖基化,而糖基化影响类黄酮在逆境应答中的作用,但小麦中相关研究较少。本论文正对这两个问题,开展了以下初步研究。乙烯合成前体ACC处理后,下胚轴和子叶叶柄颜色变浅,花青素含量及花青素合成通路酶编码基因DFR(二氢黄酮醇还原酶)和ANS(黄酮醇合成酶)的表达水平降低,而乙烯作用抑制剂AgNO3处理正好相反。乙烯受体及信号通路关键调控因子EIN3的突变与AgNO3处理的表型一致,也促进花青素的富集。EIN3能结合CHS和DFR启动子。结果表明,萌发后阶段乙烯抑制类黄酮的合成,并且乙烯可能通过EIN3直接调控类黄酮合成。在乙烯处理下,类黄酮合成通路限速酶CHS突变体chs的下胚轴长度抑制程度明显低于野生型拟南芥,而子叶开度显著大于相对应处理的野生型拟南芥,表明类黄酮参与了萌发后阶段对乙烯的响应过程。花青素和黄酮醇分支通路突变体无这一效应,暗示可能其他类型类黄酮参与了这一过程。chs下胚轴中ROS含量明显提高,而且对乙烯诱导ROS富集的效应不敏感。我们鉴定了一个小麦花青素糖基转移酶基因Ta UGT。Ta UGT在胁迫条件下表达量降低,其编码产物定位在内质网、高尔基体和细胞核。TaUGT在体外没有检测到花青素UDP-葡糖基转移酶活性。TaUGT异位表达降低了拟南芥对MV和甘露醇的耐受性,初步表明Ta UGT可以降低植物的耐逆能力。
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