生姜醇提物通过抑制CDK2活性诱导肿瘤细胞凋亡

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恶性肿瘤是当前世界上死亡率最高的疾病之一,严重威胁着人类的健康。寻找新的高效低毒的抗肿瘤药物一直是科学界研究的重点。其中一条重要途径就是提取天然来源的具有抗肿瘤活性药物的主要成分,对其进行分子机制的研究,从而提取其有效成分进行改造,开发出具有高效低毒的抗肿瘤新药。  生姜具有散寒解表,解毒等功效,民间有用生姜治疗肿瘤的报道。国内外从七十年代始有生姜抗肿瘤研究报道。然而,对其具体的分子机制,却未见相关文献。本论文在此基础上,利用现代分子细胞生物学等技术手段,对生姜乙醇提取物进行了作为抗肿瘤潜在药物研发的相关药效及药理学研究。并与顺铂进行比较,期望能找到比顺铂毒性更低而活性更好的药物,为生姜临床用于癌症的治疗提供理论依据和数据支持。  在药效学水平,本论文对生姜乙醇提取物运用形态学观察和MTT法进行了体外抗肿瘤活性的IC50值测定。结果表明,生姜乙醇提取物表现出良好的抗肿瘤活性,其IC50值达到25μM。  在药理学水平,主要是研究生姜醇提物抑制肿瘤细胞 CDK2活性,从而诱导细胞凋亡的机制。CDK2活性检测试剂盒检测表明生姜醇提物具有抑制 CDK2的作用及具有浓度梯度依赖性;流式细胞术分析表明 CDK2受抑制后,细胞周期被阻断在 G0/G1期,从而使细胞发生凋亡;通过 Hoechst33258荧光染色技术证明其醇提物能诱导细胞产生凋亡小体;DNA损伤实验验证醇提物增强 DNA断裂的能力。在整体动物水平,醇提物抑制CDK2活性,引起斑马鱼胚胎眼部和头部发育迟缓。
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