功能性食品中双酚类化合物的检测方法研究

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随着保健食品行业快速发展,功能性食品(保健食品)的日常食用量越来越大,食品接触包装材料中有毒有害物质的迁移对人体的影响越来越受到重视。近年来发现,在功能性食品制造过程中不可避免使用的接触性包装材料中双酚类物质会迁移到食品中,对人体健康有严重危害,尤其是影响婴幼儿的大脑发育和免疫遗传功能。本课题研究的双酚类化合物有14种:双酚A(BPA)、双酚F(BPF)、四氯双酚A(TCBPA)、四溴双酚A(TBBPA)、双酚A二缩水甘油醚(BADGE)、双酚A-(2,3-二羟基丙基甘油醚)(BADGE-H2O)、双酚A-(3-氯-2-羟丙基甘油醚)(BADGE-HCl)、双酚A-双(2,3-二羟基丙基醚)(BADGE-2H2O)、双酚A-双-(3-氯-2-羟丙基)甘油醚(BADGE-2HCl)、双酚A-(3-氯-2-羟丙基)(2,3-二羟丙基醚)(BADGE-HCl-H2O)、双酚F二缩水甘油醚(BFDGE)、双酚F-双(2,3-二羟基丙基醚)(BFDGE-2H2O)、双酚F-双-(3-氯-2-羟丙基)甘油醚(BFDGE-2HCl)和双酚S(BPS)。在功能性食品加工运输贮藏等过程中不可避免使用的接触性包装材料中双酚类化合物会迁移到食品中,严重危害人体健康,致畸、致癌、致突变等严重后果,尤其是影响婴幼儿的大脑发育和免疫遗传功能。在国内外对于双酚类化合物残留量的检测报道中,最多仅检测了其中11种双酚类化合物,覆盖面并不广。本课题主要关注功能性食品中14种双酚类化合物的检测方法研究。在前处理方法方面,优化了样品的提取和净化步骤;在分析方法上,采用5 mmol/L醋酸铵水溶液(含1‰甲酸)-甲醇作为流动相进行梯度洗脱,以Thermo Aquasil C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,3.0μm)和Waters Atlantis T3色谱柱(150 mm×2.1 mm,3.0μm)进行分离,并结合高效液相色谱-质谱/质谱仪(HPLC-MS/MS)进行精确定性定量研究。第二章建立了以固相分散萃取(Qu ECh ERS)前处理方法,使用HPLC-MS/MS同时分析功能性食品中双酚A(BPA)、双酚F(BPF)及卤代双酚类化合物(TCBPA和TBBPA),4种双酚类化合物的残留量,采用基质匹配标准溶液外标法定量。4种双酚类化合物在0.5~50.0μg/kg范围内线性很好,相关系数均大于0.9990。定量限(S/N>10)在0.9~1.5μg/kg之间,检出限(S/N>3)在0.2~0.4μg/kg之间。于配方奶粉、口服液和鱼油胶囊基质中进行三水平(2.0μg/kg、5.0μg/kg和10.0μg/kg)添加回收试验,检测结果显示,4种双酚类化合物的加标回收率分别在81.5%~101.2%、83.0%~102.0%和73.3%~88.1%之间,相对标准偏差(RSDs)分别在3.5%~9.3%、3.5%~9.6%和3.6%~9.5%之间。第三章建立了以固相分散萃取(Qu ECh ERS)前处理方法,使用HPLC-MS/MS同时分析功能性食品中双酚A环氧化物(BADGE、BADGE-H2O、BADGE-2H2O、BADGE-HCl、BADGE-2HCl和BADGE-HCl-H2O)、双酚F环氧化物(BFDGE、BFDGE-2H2O、BFDGE-2HCl)及双酚S(BPS),10种双酚类化合物的残留量,采用基质匹配标准溶液外标法定量。10种双酚类化合物在0.5~50.0μg/kg范围内线性很好,相关系数均大于0.9990。定量限(S/N>10)在0.4~1.7μg/kg之间,检出限(S/N>3)在0.1~0.5μg/kg之间。于配方奶粉、口服液和鱼油胶囊基质中进行三水平(2.0μg/kg、5.0μg/kg和10.0μg/kg)添加回收试验,检测结果显示,10种双酚类化合物的加标回收率分别在79.3%~110.3%、80.1%~106.5%和70.5%~87.9%之间,相对标准偏差(RSDs)分别在5.9%~10.5%、6.0%~9.6%和5.8%~10.4%之间。第四章建立了建立了以固相分散萃取(Qu ECh ERS)前处理方法,使用HPLC-MS/MS同时分析功能性食品中双酚A(BPA)、双酚F(BPF)、四氯双酚A(TCBPA)、四溴双酚A(TBBPA)、双酚A二缩水甘油醚(BADGE)、双酚A-(2,3-二羟基丙基甘油醚)(BADGE-H2O)、双酚A-(3-氯-2-羟丙基甘油醚)(BADGE-HCl)、双酚A-双(2,3-二羟基丙基醚)(BADGE-2H2O)、双酚A-双-(3-氯-2-羟丙基)甘油醚(BADGE-2HCl)、双酚A-(3-氯-2-羟丙基)(2,3-二羟丙基醚)(BADGE-HCl-H2O)、双酚F二缩水甘油醚(BFDGE)、双酚F-双(2,3-二羟基丙基醚)(BFDGE-2H2O)、双酚F-双-(3-氯-2-羟丙基)甘油醚(BFDGE-2HCl)和双酚S(BPS)14种双酚类化合物的残留量,采用基质匹配BPA-d16、TBBPA-d10和BPS-c13同位素内标法定量。于婴幼儿配方乳粉、婴幼儿配方谷粉和婴幼儿辅食果泥中进行三水平添加回收试验(TBBPA:25~125μg/kg,BADGE-2HCl:10.0~50.0μg/kg,其余化合物:5~25μg/kg),检测结果显示,14种双酚类化合物的加标回收率分别在89.2%~107.1%、89.3%~105.3%和84.0%~95.8%之间,相对标准偏差分别在5.6%~9.3%、5.0%~9.4%和5.9%~9.2%之间。定量限(S/N>10)在1.0~2.0μg/kg之间,检出限(S/N>3)在0.3~0.7μg/kg之间。本课题建立了同时测定功能性食品中多种双酚类化合物检测的三种方法,最多可以一次进样14种双酚类化合物同时检测的高效分析效率,多于文献报道中最多同时检测的数量(11种),基质匹配外标法或同位素内标法定量,且方法灵敏度高,定量限在0.9~1.5μg/kg,低于该文献中的2.0~10.0μg/kg,同时操作简便,分析时间短,准确性好,精密度佳,符合残留分析要求,已成功运用于实际样品的测定,具有实际应用价值。
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