我国主要产地决明子多糖与蒽醌指纹图谱及其提取技术的研究

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豆科植物决明(Cassia obtusifolia L.)或小决明(Cassia toraL.)的干燥成熟种子称为决明子,是药食两用的种子,其主要活性成分为多糖及蒽醌。《中华人民共和国药典》记载决明子具有降压作用、降血脂作用、明目作用、保肝作用、泻下作用和提高免疫力的作用。我国是决明子主产区,虽然对决明子成分及其功效作用有不少研究,但未对全国主要决明子中多糖和蒽醌的主要组成和含量进行系统研究。本研究对我国主要决明子的多糖和蒽醌的主要组成和含量的指纹图谱进行系统分析,研究了多糖和蒽醌的提取技术,建立了决明子多糖的测定方法,为决明子的深度开发和利用提供了技术支持。主要的研究结果为:1.建立了准确测定决明子多糖的方法,研究了我国主要决明子多糖的指纹图谱。使用气相色谱分析不同产地决明子单糖组成和含量,得到决明子单糖组成摩尔比,获得了我国主要决明子多糖的指纹图谱。根据单糖摩尔比配制单糖混合标准溶液,比较了高锰酸钾滴定法、蒽酮硫酸比色法、苯酚硫酸比色法测定决明子多糖含量的差异,确定以葡萄糖/甘露糖作为标准的上述三种方法测定决明子多糖含量的校正系数,以建立适合决明子多糖的测定方法。结果表明不同产地决明子多糖的单糖组成及平均单糖摩尔比为甘露糖:半乳糖:木糖:葡糖:阿拉伯糖=49.14:23.35:13.08:7.61:7.16。苯酚硫酸比色法为测定决明子多糖含量最合适的化学方法,其操作方法简单,反应重点易于判断,重现性好;其校正系数为1.08(葡萄糖做标准品)或0.92(甘露糖做标准品)。2.优化了决明子多糖的提取工艺,建立了适合工业化提取决明子多糖的技术。结合考虑无限极公司的提取设备和工艺,研究粉碎及微波前处理工艺对决明子多糖得率的影响,选择微波前处理功率、微波前处理时间、料液比、提取时间作为单因素,利用相应面法优化得到决明子多糖的最佳提取工艺为微波时间45s、微波功率480w、料液比30ml/g、提取时间3h。3.研究了我国主要决明子蒽醌的指纹图谱,优化了决明子蒽醌的提取工艺。利用正交法优化决明子蒽醌的提取工艺,其提取条件为:提取温度60℃,料液比1:30,20%硫酸与氯仿溶剂比0.6,提取时间2h。使用HPLC方法对决明子蒽醌进行定性与定量分析,获得了我国主要决明子蒽醌的指纹图谱,结果表明,9个不同产地决明子6种蒽醌的含量依次是大黄酚>大黄酸>橙黄决明素>芦荟大黄素>大黄素甲醚>大黄素。大黄酚含量都达中国药典对决明子蒽醌中大黄酚含量≥0.2%的要求,除河南与印度产地外,其他产地决明子中橙黄决明素含量均达药典对决明子橙黄决明素含量≥0.08%的要求。4.以不同产地决明子的种子特征,结合其生态适应性及化学活性物质,对决明子种质进行评价,为筛选优质的决明子种质提供依据;在不同的储藏环境温度、湿度下,研究不同的储藏环境对决明子品质的影响。结果表明,河北产地的决明子品质最好。决明子储藏的环境温度控制在10℃~25℃,环境湿度控制在0~70%下,温度与湿度对决明子品质影响较小,储藏150天未见黄曲霉的生长。
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