姜黄素介导TLR4通路抗炎—抗肝癌作用的动物实验研究

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目的:探讨姜黄素对肝癌裸鼠皮下移植瘤的抑制作用,及介导TLR4通路抗炎-抗肝癌分子机制研究。方法:1.42只裸鼠用于肝癌皮下移植瘤模型的建立,第15d成功造模40只。然后将成功造模的40只肝癌皮下移植瘤裸鼠完全随机分为4组,分别为HDC(High doses curcumin)组(10只)、LDC(Low doses curcumin)组(10只)、阳性对照组(10只)、模型组(10只),另设置正常组(10只),共计5组。造模后第15d时开始灌胃给药,HDC组的给药剂量286.65mg/kg/d(每日0.4m L/d,浓度为14.33mg/m L),LDC组的给药剂量为57.33mg/kg/d(每日0.4m L/d,浓度为2.87mg/m L),连续给药14d;阳性对照组,5-fu:50mg/kg/次+顺铂:5mg/kg/次(浓度为1.25mg/m L+0.25mg/m L)1次/W,腹腔注射。正常组、模型组予以等量0.4m L/d,0.9%氯化钠溶液灌胃,连续给药14d。2.药物干预14d后处死,观察裸鼠的一般状态、成瘤率及皮下移植瘤的生长情况,剥离皮下移植瘤,称量瘤重,计算抑瘤率。Western blot方法检测移植瘤组织中TLR4(Toll-like receptor 4)、NF-_?B(Nuelear factor-ka PPa B)、iNOS(Inducible nitric oxide synthase)蛋白阳性表达情况。结果:1.姜黄素对肝癌裸鼠皮下移植瘤有显著的抑制作用,HDC组(364.64±42.65mm3)、LDC组(547.97±43.12mm3)、阳性对照组(646.76±168.66mm3)肝癌皮下移植瘤的平均瘤重与模型组(1285.97±79.38mm3)相比均降低(P<0.01),其中HDC组平均瘤重最低,且抑瘤率最高;HDC组、LDC组、阳性对照组抑瘤率分别为:79.4%,57.4%,49.7%;2.Western blot结果显示:肝癌裸鼠皮下移植瘤组织中TLR4蛋白阳性表达:HDC组(0.116±0.028)、LDC组(0.24±0.037)、阳性对照组(0.27±0.025)中明显均低于模型组(0.37±0.04)(P<0.01);其中HDC组与阳性对照组相比,明显低于阳性对照组(P<0.01);与LDC组相比明显低于与LDC组(P<0.01);LDC与阳性对照组相比,明显低于阳性对照组(P<0.01)。3.肝癌皮下移植瘤组织中NF-_?B蛋白阳性表达:HDC组(0.12±0.04)、LDC组(0.16±0.035)、阳性对照组(0.22±0.021)明显均低于模型组(0.37±0.03)(P<0.01);其中HDC组与阳性对照组相比,明显低于阳性对照组(P<0.01);与LDC组相比明显低于与LDC组(P<0.01);LDC与阳性对照组相比,明显低于阳性对照组(P<0.01)。4.肝癌皮下移植瘤组织中iNOS蛋白阳性表达:HDC组(0.14±0.033)、LDC(0.24±0.034)、阳性对照组(0.35±0.045)均低于模型组(0.47±0.043),(P<0.01),其中HDC组与阳性对照组相比,明显低于阳性对照组(P<0.01);与LDC组相比明显低于与LDC组(P<0.01);LDC与阳性对照组相比,明显低于阳性对照组(P<0.01)。结论:1.姜黄素对肝癌裸鼠皮下移植瘤的生长有明显的抑制作用,且与剂量有一定的相关性。2.姜黄素通过抑制TLR4,从而抑制NF-_?B、iNOS的释放,抑制炎症反应,发挥抗肝癌作用。
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