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目的:通过研究黄芩片、酒黄芩、黄芩炭的水提取液和乙醇提取液对六种标准菌株(大肠埃希菌[CMCC(B)44103]、金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]、枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63501]、藤黄微球菌[CMCC(B)28001]、白色念珠菌[CMCC(F)98001]、短小芽孢杆菌[CMCC(B)63202]))的体外抑菌能力,测定黄芩炮制品中主要黄酮类成分黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的含量,建立黄芩炮制品指纹图谱,探索黄芩不同炮制品抗菌活性和黄酮类成分之间的量效关系。
方法:制备黄芩制品不同浓度的水提液和醇提液。采用二倍稀释法对六种标准菌株进行抑杀菌实验;采用抗生素微生物检定法的管碟法,筛选生物检定法实验条件;采用HPLC法测定黄芩炮制品中黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的含量;依据峰面积和保留时间确定参照峰和共有峰,运用中药指纹图谱相似度评价系统计算相似度,建立黄芩炮制品指纹图谱。
成果:黄芩炮制品水提液和醇提液对六种试验菌株敏感,醇提液抑杀菌浓度更小;以黄芩片对照药材为工作标准品,在0.2048g·mL-1~0.9766g·mL-1范围内,剂量(对数值)和反应效应呈线性关系,r=0.9975(n=8);首次采用罗红霉素为标准品,测定四批黄芩炭的效价;建立了HPLC法指纹图谱,选择黄芩苷为参照峰,标定15个共有峰,测定了黄芩炮制品中黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的含量,黄芩苷的含量与黄芩素、汉黄芩素的含量呈相反的变化趋势,与抗菌活性呈相反趋势。
结论:建立的黄芩炮制品生物检定法,能够通过比较抗菌活性的大小,反映药物的整体疗效。生物检定法与HPLC各有侧重,从化学和生物角度评价黄芩炮制品的质量。