碳源对聚磷菌胞内物质转化的影响及光谱分析

来源 :安徽建筑大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:BFM_99
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
不同碳源条件下聚磷菌胞内物质的转化与除磷功能密切相关,研究不同碳源对聚磷菌胞内物质的转化的影响及碳源与除磷功能的内在联系,有助于揭示生物除磷的微观机制,具有重要意义。胞内物质的实时检测是及时掌握聚磷菌代谢优劣的重要途径,但传统的胞内物质的检测方法较复杂提取耗时长且很多试剂对人体伤害较大,污染环境,光谱法具有无污染,不需对样品进行较复杂的预处理、快捷方便,利用光谱法实现胞内物质的快速检测对于及时分析聚磷菌的代谢具有重要意义。然而,关于不同碳源对纯种聚磷菌胞内物质转化的影响及其胞内物质的光谱分析的研究相对较少。该研究利用实验室筛选的不动杆菌属聚磷菌,通过改变碳源研究不同碳源(乙酸钠、丙酸钠、葡萄糖、乳酸)对聚磷菌胞内物质转化的影响,并采用三维荧光光谱法、拉曼光谱法实现对胞内物质转化的定性和定量分析。主要研究结果如下:(1)实验室筛选的不动杆菌属聚磷菌在4种不同碳源但相同碳浓度的培养基中培养,观察OD600(细菌细胞密度测量)的变化。研究结果表明,不动杆菌属在以乙酸钠为碳源的培养基中OD600增长较快,16 h后OD600趋于稳定,表明聚磷菌16 h内生长较快然后生长较为平稳;在以葡萄糖为碳源时16 h内OD600增长较为缓慢,之后OD600增长较快,表明聚磷菌16 h前生长较为缓慢后生长较快;在以丙酸钠、乳酸的培养基中OD600几乎没有变化趋于稳定状态,表明聚磷菌几乎没有增长。(2)采用传统的化学检测法对不动杆菌属聚磷菌在乙酸钠、丙酸钠、葡萄糖、乳酸4种不同碳源下的常规指标和胞内物质进行分析。常规指标分析结果表明:在厌氧阶段,聚磷菌对COD的吸收率为丙酸钠>葡萄糖>乙酸钠>乳酸,正磷酸盐释放率为丙酸钠>乙酸钠>葡萄糖>乳酸。在好氧阶段,聚磷菌在4种碳源下除磷效果为丙酸钠>乙酸钠>葡萄糖>乳酸。胞内物质分析结果表明,聚磷菌在厌氧阶段,在乙酸钠、丙酸钠、葡萄糖、乳酸4种碳源中聚-β-羟基丁酸酯(PHB)分别增长97.61%、264.33%、153.16%、117.25%,聚合磷酸盐(poly-P)分别减少14.28%、15.76%、23.58%、65.53%,糖原分别减少14.97%、17.20%、18.97%、25.56%;在好氧阶段,碳源为乙酸钠、丙酸钠、葡萄糖、乳酸时PHB分别减少77.88%、93.54%、91.90%、59.71%。经过完整周期后,碳源为乙酸钠、丙酸钠、葡萄糖、乳酸时,聚磷菌胞内糖原分别增长-1.52%、30.09%、18.56%、2.71%,poly-P分别增长33.90%、60.20%、43.01%、8.10%。(3)采用三维荧光光谱分析及荧光区域积分法不动杆菌属在4种不同碳源下不同时期胞内物质转化情况。三维荧光图谱结果表明:不动杆菌属聚磷菌在4种不同碳源两个不同阶段胞内物质都出现还原型辅酶Ⅰ(NADH)和色氨酸。当碳源分别为乙酸钠、丙酸钠、葡萄糖、乳酸时,厌氧末端聚磷菌胞内NADH峰A的荧光波峰强度分别减弱了16.59、36.64、34.34、14.66,好氧末端聚磷菌胞内NADH荧光强度分别增强了37.73、73.88、41.94、16.43。厌氧阶段,碳源为葡萄糖时聚磷菌胞内色氨酸荧光强度增强,其它碳源中均降低,好氧阶段4种碳源中聚磷菌胞内色氨酸荧光强度均降低。采用荧光区域积分法对各区域光谱强度进行积分,结果表明,荧光区域标准体积与各物质对应的区域内波峰荧光强度变化趋势相同,荧光强度减弱其对应荧光区域内荧光区域积分标准体积也减小,荧光强度增强其荧光区域积分标准体积也增大。通过标准样品NADH浓度与三维荧光强度建立线性关系y=8.629x+58.061,求得不动杆菌属聚磷菌在以乙酸钠、丙酸钠、葡萄糖、乳酸为碳源时,厌氧阶段NADH的浓度分别减少1.92 mmol/L、4.25 mmol/L、3.98 mmol/L、0 mmol/L,在好氧阶段NADH的浓度分别增长4.37mmol/L、8.56 mmol/L、4.86 mmol/L、0 mmol/L。(4)采用拉曼光谱法对不动杆菌属聚磷菌胞内物质的变化进行定性表征。分析结果表明,拉曼光谱强度较好的表征了4种碳源下不同阶段的聚磷菌胞内糖原、poly-P、PHB的变化,在乙酸钠、丙酸钠、葡萄糖、乳酸4种碳源中,厌氧阶段聚磷菌胞内糖原拉曼强度分别减弱了3.62、19.13、24.31、2.47,poly-P的拉曼强度分别减弱了21.73、145.22、170.65、15.20,PHB拉曼强度分别增强了52.55、66.07、64.96、24.79。好氧阶段聚磷菌胞内糖原拉曼强度分别增长了4.02、32.43、48.62、13.56,poly-P拉曼强度分别增长了50.10、257.58、240.17、38.01,PHB拉曼强度分别降低了122.61、141.20、110.64、54.39。(5)采用拉曼光谱法结合组合间隔偏最小二乘法(siPLS)模型对不动杆菌属聚磷菌胞内物质进行定量分析。拉曼光谱结合siPLS模型分别对不动杆菌属聚磷菌胞内物质PHB、poly-P、糖原建立定量分析模型。定量分析模型结果表明,PHB、poly-P、糖原模型预测相关系数rc分别为0.8685、0.9365、0.8972,预测均方根误差(RMSECV)分别为0.3642、0.6979、6.2803,验证相关系数rp分别为0.9364、0.8931、0.9253,验证均方根误差(RMSEP)分别为0.1306、0.9696、5.8980;PHB的siPLS模型最优组合区间470-555 cm-1、755-840 cm-1、1320-1405cm-1、1745-1830 cm-1,poly-P的siPLS模型最优组合区间385-470 cm-1、640-725cm-1、1150-1235 cm-1,糖原siPLS模型最优区间413.33-526.67 cm-1、753.33-866.67cm-1、1320-1433.33 cm-1、1886.67-2000 cm-1。该试验研究分析碳源对单一菌属聚磷菌胞内物质转化的影响,采用光谱技术对胞内物质进行快速定性分析,拉曼光谱结合siPLS模型对胞内物质PHB、poly-P、糖原定量分析,丰富了碳源对单一菌属聚磷菌的研究理论,且提供了光谱对胞内物质快速检测的技术依据。
其他文献
<正>雪……杭春晓(艺术评论家,以下简称杭)我看到了《真空妙有》这本画册,实际上是你在台湾的一个个展。
高职高专院校大多数是从中专学校升格而来。在实行高校管理模式后,教职工的待遇有了显著提高,同时教师的科研压力也明显增大。而班级管理工作与本科高校相比要繁重得多,担任
目的:探讨各种肝病患者血清层粘连蛋白(LN),透明质酸(HA)和IV型胶原(IV-C)水平及临床意义。方法:应用放射免疫法(RIA)测定115例各种肝病患者血清层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA)和IV型胶原(IV-C)水平及肝功能指标(ALT、A/G、Bil)。结果
现阶段,MOOC(Massive Open Online Course)具有十分重要的实际应用价值。为了加快高校图书馆创新服务的发展,建立图书馆个性化服务,提出基于MOOC教学模式下高校图书馆创新服务
<正>仓储是物流的重要组成部分,也是生产与流通的重要环节,仓储工作的质量,直接影响到物流网络的运行效率、影响到企业生产与流通的正常经营。如何评价仓储服务的工作质量,在
教育学是以教育为研究对象的学科知识体系,其内在知识体系的性质决定了教育学作为学科的特质属性。文章拟对教育学学科性质与教育学知识性质分别加以阐述,以期能够对教育学性
为了既保护农民的土地承包经营权,又能有效促进土地流转,十八届三中全会提出了“三权分置”的改革措施,农村集体土地上的权利分为土地所有权、土地承包权和土地经营权。2018年12月29日,《中华人民共和国农村土地承包法修正案(草案)》在全国人大常委会通过,其中第36条,明确规定了土地经营权可以依法采取入股的方式流转。土地经营权入股农民专业合作社在提高农民收益、实行农业现代化经营、激活农村土地经济功能方面