红肉苹果花青苷提取液对猪卵巢颗粒细胞抗氧化作用研究

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花青苷(Anthocyanin)普遍存在于植物的果实、花朵、叶片中,是一种天然水溶性色素,它也是造成蓝莓、草莓、李子、柑橘等水果呈现蓝、紫、红色等不同颜色的原因。先前有研究表明,花青苷能够清除自由基、拥有抗氧化等功能。新疆红肉苹果(Malus sieversiif.neidzwetzkyana(Dieck) Langenf)果肉呈鲜红色,富含花青苷,被誉为功能性水果。因此我们从体内抗氧化,即对猪卵巢颗粒细胞颗粒细胞的影响和体外抗氧化两方面入手,研究了红肉苹果花青苷的抗氧化活性以及比较它和白肉苹果的代谢物差异,结果如下:  为了研究红肉苹果花青苷提取液体外清除自由基的能力,我们采取三种模型,分别研究其对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基的清除能力,通过使用维生素C(vitamin C,Vc)作为阳性对照,研究发现红肉苹果花青苷提取液清除自由基的效果较好,特别是对DPPH的清除,清除率达90%以上。当红肉苹果花青苷提取液和维生素C的浓度为35 mg·L-1时,其清除DPPH自由基的能力分别为92.77%和79.87%,清除·OH-分别为52.11%和22.77%,清除O2-.分别为41.44%和10.53%。  为了研究红肉苹果花青苷对猪卵巢颗粒细胞的影响,我们使用活性氧升高剂(Rosup)处理细胞,建立一个氧化应激的模型。通过对猪卵巢颗粒细胞添加活性氧升高剂发现,Rosup可以使猪卵巢颗粒细胞的阳性细胞率显著升高,猪卵巢颗粒细胞内的活性氧(ROS)水平上升显著,相关抗氧化酶活力、谷胱甘肽含量和抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平显著下降,促凋亡蛋白Bax表达水平显著上升。当对猪卵巢颗粒细胞添加不同浓度的红肉苹果花青苷预处理后发现,200μM红肉苹果花青苷在一定程度上可以降低猪卵巢颗粒细胞的阳性细胞率和细胞内的活性氧(ROS)水平,使得相关抗氧化酶活力和谷胱甘肽含量以及抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平上调,而促凋亡蛋白Bax表达水平下调。与此过程相关的基因SOD1,CAT和GPX1表达上调。试验研究结果表明,Rosup能使猪卵巢颗粒细胞造成氧化损伤,且红肉苹果花青苷可以在一定程度上挽救这种氧化损伤。  为了研究红肉苹果‘红勋1号’与白肉苹果‘福丽’的代谢物的差异,我们使用UPLC-QTOF-MS技术对其进行了非靶向代谢组学的比较分析,对代表性的差异代谢物进行统计和分析,找到了它们可能存在的差异代谢物。
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