桑白皮黄酮调控HIF-1α影响非酒精性脂肪肝与脂肪生成的作用

来源 :广州中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hzzaa
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目的:本文是在前期研究和国内外研究的基础上,采用动物实验的方法,探讨桑白皮黄酮通过HIF-1α通路影响血管生成改善非酒精性脂肪肝与脂肪生成的作用。方法:采用纯高脂饮食的方法,建立由肥胖引起非酒精性脂肪肝的模型,造模9周后,连续灌胃给药12周,通过分析桑白皮黄酮对各组大鼠空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、口服葡萄糖耐量(OGTT)、肝脏和肾周脂肪组织形态学、实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)、免疫荧光检测和蛋白免疫印迹法(Western Blot,WB)检测缺氧诱导因子-1(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、血小板衍生因子(PDGF)、一氧化氮合酶(iNOs)mRNA和缺氧诱导因子-1(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、血小板衍生因子(PDGF)、一氧化氮合酶(iNOs)蛋白的表达,并分析可能存在于其中的机制。结果:1、桑白皮黄酮可以明显降低模型组大鼠的体重,说明桑白皮黄酮有减轻体重的良好功效;还具有能够显著降低模型组大鼠基础血液指标(FBG、TC、TG)水平,改善糖脂水平;能够有效改善肝脏和肾周脂肪组织的病理状态;OGTT结果表明桑白皮黄酮可以良好的控制模型组大鼠葡萄糖耐受。2、桑白皮黄酮对肝脏和肾周脂肪指数的影响:桑白皮黄酮能够明显改善肝脏和肾周脂肪指数,肝脏形态上,桑白皮黄酮均为质地紧实、红润、表面光滑、大小适中,改善模型组大鼠肝脏脂肪变性,减轻肝脏表面凹凸不平,肝脏成土黄色,易破损,破损处成豆腐渣状的状况。3、桑白皮黄酮对肝脏损伤指数的影响:给药桑白皮黄酮后,无论是桑白皮黄酮高剂量还是桑白皮黄酮低剂量,血清中肝损判断指标GOT、GPT含量均明显降低。4、桑白皮黄酮对肝脏和肾周脂肪形态学的影响:在显微镜下观察,桑白皮黄酮高剂量可以有效改善肝脏的脂肪变性程度,小泡样脂肪变性几乎不可见,也并无坏死和炎性浸润,可见桑白皮黄酮对肥胖引起的脂肪肝病变,从形态结构上即可看出其显著疗效,效果几乎与正常组大鼠肝脏无异。而油红O染色检验结果则直观上直接证实了各组大鼠的肝脏脂肪变性严重程度,高剂量组中几乎不可见红染的脂质,也突出展现了桑白皮黄酮对肝细胞内脂质积累良好的抑制作用。实验结果显示,桑白皮黄酮大鼠肾周脂肪细胞密度大小适宜,体积大小适中,细胞大小不一,而模型组脂肪细胞数目增多,体积增大。从微观角度阐明了肥胖模型的建立是成功的。桑白皮黄酮有显著的减重作用,因此桑白皮黄酮高、低剂量对脂肪细胞中脂质积累的抑制起到了明显作用,也解释了桑白皮黄酮的减重作用的由来。5、桑白皮黄酮对HIF-1α通路调控的作用:桑白皮黄酮可适当降低肝脏和肾周脂肪中的HIF-1α蛋白及其下游血管生成相关基因VEGF、PDGF、iNOs的表达,提示桑白皮黄酮对肝脏病变和脂肪生成,具有较好的治疗作用。结论:模型组大鼠的体重能够被桑白皮黄酮明显降低,桑白皮黄酮有减轻体重的良好功效;能够显著降低模型组大鼠基础血液指标水平,改善糖脂代谢;肝脏和脂肪组织病理状态能够被明显改善,良好的控制模型组大鼠葡萄糖耐受。桑白皮黄酮能够明显改善肝脏和肾周脂肪指数,肝脏形态上,改善模型组大鼠肝脏脂肪变性,质地紧实、红润、表面光滑、大小适中。给药桑白皮黄酮后,血清中GOT、GPT含量均有明显下降,改善肝脏的损伤程度。桑白皮黄酮可以有效改善肝脏的脂肪变性程度,小泡样脂肪变性几乎不可见,也并无坏死和炎性浸润,可见桑白皮黄酮对肥胖引起的脂肪肝病变,对肝细胞内脂质积累良好的抑制作用。桑白皮黄酮可适当降低肝脏和肾周脂肪中的HIF-1α蛋白及其下游血管生成相关基因和蛋白,推测桑白皮黄酮可能通过调节HIF-1α通路及下游血管生成相关指标的分泌来改善非酒精性脂肪肝和脂肪生成。综上所述,桑白皮对改善非酒精性脂肪肝和脂肪生成具有一定的作用,从总体效果的角度进行比较,桑白皮黄酮高剂量的模型大鼠效果更优,具体表现为明显降低大鼠体重、糖脂代谢含量,改善肝脏和肾周脂肪组织的病理形态,同时在分子水平上探讨HIF-1α的通路并进行干预,验证了HIF-1α蛋白是桑白皮黄酮对非酒精性脂肪肝和脂肪生成改善作用的重要因素,桑白皮黄酮能够有效抑制HIF-1α通路的激活。
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