[目的]：观察缺氧／复氧条件下星形胶质细胞AQP4、AQP5的表达变化以及亚低温对其表达变化的影响，探讨脑缺血再灌注脑水肿与AQP4、AQP5的关系以及亚低温对脑缺血再灌注损伤的保护机制。 [方法]：利用新生24小时内的SD大鼠，取皮层新鲜脑组织，经机械分离和化学消化，制作细胞悬液，调整细胞密度为5×10<5>／cm<2>，接种到含胎牛血清培养基的培养瓶中，置培养箱中进行原代培养，利用倒置显微镜观察细胞生长及分化的形态学变化。培养8-9天后传代，当传至第3代，细胞生长稳定，自然纯化后，神经胶质纤维酸性蛋白(glia fibrillary acid protein，GFAP)免疫细胞化学染色鉴定星形胶质细胞，95％以上为阳性细胞，符合实验要求。将星形胶质细胞分为正常对照组(C)、常温缺氧／复氧组(H／R)、亚低温干预缺氧／复氧组(M+H／R)。用三气培养箱分别调节温度37℃及32℃，以95％N<，2>和5％CO<,2>造成细胞缺氧，用台盼蓝染色法测定37℃及32℃时，缺氧／复氧不同时间点AC的存活率，作为细胞受损指标，用倒置相差显微镜对细胞进行形态学观察，应用细胞免疫化学技术检验缺氧／复氧各个时间点AQP4、AQP5的表达变化及亚低温的干预效果。 [结果]： 1．体外培养的AC传3代后，细胞胞体较大而扁，形状不规则，细胞突起较多较长，呈放射状。GFAP免疫细胞化学染色鉴定星形胶质细胞胞浆呈棕黄色。 2．37℃缺氧8小时后，细胞的形态、存活力变化不明显，部分细胞边缘皱缩。随着复氧时间的延长，细胞变化逐渐明显，细胞损伤表现明显加强，表现为细胞肿胀、变圆、轮廓不清，突起增粗缩短，细胞间连接断裂，逐渐出现细胞死亡、崩解、胞体漂浮。细胞存活力下降，呈明显的时效关系。32℃干预时大部分细胞轮廓较清晰，胞周光晕明显，突起存在，仅有少数细胞出现分离现象。细胞存活力较缺氧／复氧组增加。 3．细胞免疫化学的半定量方法观察AQP4、AQP5的表达发现：37℃正常氧供时AQP4、AQP5位于细胞膜上的表达无明显变化；37℃缺氧8小时，AQP4阳性表达细胞数减少，AQP5阳性表达细胞数也减少。而复氧后AQP4、AQP5阳性表达细胞数升高并随时间延长呈增高趋势。与对照组相比差异有显著性(p<0.01，p<0.05)。 4．32℃干预缺氧／复氧时AQP4、AQP5阳性表达细胞数在各个时间点均较37℃缺氧／复氧组减少(p<0.01，p<0.05)。 [结论]： 1．星形胶质细胞对缺氧的耐受能力较强，复氧后细胞损害随着时间延长明显加重。 2．亚低温可以减轻缺氧／复氧时星形胶质细胞的损伤。 3．AQP4、AQP5在缺氧时表达减少，是机体对脑损伤的一种保护性反应，以．减缓脑水肿形成。复氧后AQP4、AQP5表达明显增高，进入失保护状态，脑水肿在随后的一定时间内也明显加重。AQP4、AQP5表达变化与脑缺血再灌注损伤时脑水肿有着相关性。 4．通过降低AQP4、AQP5的表达，可能是亚低温减轻脑水肿的作用机制之一。