论文部分内容阅读
[目的]观察愈痫灵颗粒对红藻氨酸(KA)致颞叶癫痫大鼠学习记忆能力及海马组织MFS(苔藓纤维出芽)的影响并研究其相关机制。[方法]通过立体定位仪向大鼠海马局部注射KA而建立颞叶癫痫模型,诱发大鼠癫痫发作,以大鼠水迷宫试验的学习、记忆成绩来评价愈痫灵颗粒对致痫鼠学习记忆能力的影响；采用透射电镜观察海马CA3区超微结构变化；运用Timm硝酸银染色法观察海马苔藓纤维出芽情况；以免疫组化法检测苔藓纤维出芽标志物生长相关蛋白(GAP43)的变化,来探讨愈痫灵颗粒对KA致颞叶癫痫大鼠学习记忆能力与海马组织MFS(苔藓纤维出芽)的影响并研究其相关机制。[结果]1.水迷宫实验结果愈痫灵组、拉莫三嗪组学习记忆成绩明显提高,与空白对照组比较,学习、记忆成绩差异无统计学意义(P>0.05),与模型组比较,学习、记忆成绩差异均具有统计学意义(P<0.05)；愈痫灵组与拉莫三嗪组比较差异无统计学意义(P>0.05),提示愈痫灵颗粒、拉莫三嗪可明显改善癫痫模型大鼠学习记忆能力。2.透射电镜观察海马CA3区超微结构结果空白对照组海马组织CA3区神经元细胞核呈圆形,核膜结构清晰,胞质内可见线粒体、粗面内质网、滑面内质网和大量的多核糖体。假手术组胶质细胞附近有局灶水肿。模型组核膜固缩、轴缩样变性,胞质内细胞器不清,异染色质增多、边聚明显,神经元细胞附近大范围水肿。胶质细胞局部水肿明显。血管内皮细胞呈固缩、凋亡样改变,神经细胞和神经毡内突触活性密度降低。拉莫三嗪组神经元胞膜轻微皱缩,局部少量水肿。愈痫灵组神经元核仁清晰,细胞内各结构清晰。提示愈痫灵颗粒、拉莫三嗪有拮抗KA致颞叶癫痫大鼠海马组织CA3区超微结构损伤的作用。3. Timm组织染色法观测海马CA3区MFS结果愈痫灵组、拉莫三嗪组苔藓纤维出芽MOD与IOD明显降低,两组与空白对照组、假手术组比较,MOD与IOD差异有统计学意义(P<0.05)；与模型组比较,MOD与IOD差异均具有统计学意义(P<0.05)；愈痫灵组与拉莫三嗪组比较,MOD与IOD差异均具有统计学意义(P<0.05),提示愈痫灵颗粒能显著降低KA致颞叶癫痫大鼠海马CA3区MFS总体阳性程度,且比拉莫三嗪改善其阳性程度的效果明显。4.免疫组化法检测苔藓纤维出芽标志物神经生长相关蛋白(GAP-43)结果愈痫灵组、拉莫三嗪组神经生长相关蛋白MOD与IOD明显降低,两组与空白对照组比较,MOD和IOD差异均有统计学意义(P<0.05)；与假手术组比较,差异无统计学意义(P>0.05)；与模型组比较,MOD和IOD差异均有显著统计学意义(P<0.01)；愈痫灵组与拉莫三嗪组比较,差异有有统计学意义(P<0.05),提示愈痫灵颗粒可抑制KA致颞叶癫痫大鼠海马CA3区GAP-43蛋白的表达,且疗效优于拉莫三嗪。[结论]1.KA致颞叶癫痫大鼠存在学习记忆能力下降。2.愈痫灵颗粒、拉莫三嗪可以改善KA致颞叶癫痫大鼠的学习记忆能力。3.愈痫灵颗粒改善KA致颞叶癫痫大鼠学习记忆能力的作用机制可能与其降低大鼠海马CA3区GAP-43免疫反应产物的过度表达,进而抑制海马苔藓纤维异常出芽,从而保护海马神经元有关。