自由流电泳是一种全液相电泳分离技术,无支持介质,它具备分析和制备两种特殊功能。这项技术被提出以来,广泛应用于多肽、蛋白质、细胞器和细胞、病毒等生物活性颗粒和分子的分离与制备。与其他电泳技术相比,自由流电泳有许多优势:（i）连续的溶质分离;（ii）由于不含吸收性基质,回收率几乎较高;（iii）温和的水环境适合酶和细胞纯化的需要,具有较高的生物活性;（iv）使用廉价的缓冲液作为分离介质,成本较低;（v）在分离中获得更好的分辨率。在自由流区带电泳系统中,带电荷的溶质被带有垂直电场的带载缓冲液连续地驱入分离室,使它们根据电泳迁移率或等电点（p I）横向偏向不同的物流,从而达到正常分离的目的。自由流电泳几乎可以兼容许多电泳模式,其中自由流区带电泳是应用最广、研究最全的模式。这项工作中,自由流区带电泳首次用于纯化复杂样品基质中的低丰度蛋白质。在自由流区带电泳分离的设计中,选择蛋清中的溶菌酶作为模型蛋白,由于其具有极低的丰度（小于1.5%）。在实验中,首先通过自由流区带电泳分离蛋清中的溶菌酶,冻干浓缩后通过Sephadex G50的凝胶过滤色谱进行纯化。在所有实验中,均使用一种特殊的聚丙烯酰胺-丙烯酸共聚物（P（AM-co-AA））凝胶对蛋白质进行表征,并优化了自由流区带电泳的条件:350 V电压,10 m A电流限制,14℃温度控制,130μL/min样品流速,4.9 m L/min载体缓冲液流速,16.3 m L/min电极缓冲液循环速度以及20 m M Tris-acetate缓冲溶液（p H 5.5）。仅需两个分离步骤,我们成功地从复杂的基质中纯化出低丰度的溶菌酶（含量约为1.4%）,使其达到具有80%的高纯度,质谱鉴定其分子量约为16.2 k Da。通过琼脂糖扩散法的标准实验,我们很好的证实了分离纯化得到的低丰度蛋白溶菌酶的抗菌活性是较高的,表明自由流区带电泳在复杂样品中纯化低丰度溶质方面具有巨大潜力,从而可以推动其在临床和制药行业的应用。