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胰腺癌是消化系统常见的恶性肿瘤之一,因其发病隐匿,早期诊断困难,根治性手术机会少并且常规化疗治疗效果有限,预后较差,5年生存率不足10%。因此,目前越来越多的研究致力于寻找新的胰腺癌的治疗靶点以及新型抗癌药物的开发,以期达到提高治疗效果,改善胰腺癌预后的目的。天然产物因其具有安全性高、不良反应少、来源广泛、多作用靶点等优势,被认为是寻找新型抗胰腺癌药物的一种可行的选择。其中,生物碱作为一类广泛存在于植物中的重要的碱性含氮化合物,因其具有良好的抗肿瘤作用而被作为候选抗癌药物的来源。番茄碱是一种从茄科植物中提取的甾体类生物碱,研究表明其对多种肿瘤具有良好的抑制作用,而目前仍未见番茄碱对胰腺癌作用的研究报道。因此,本研究旨在探索番茄碱对胰腺癌的抑制作用,并且探讨其可能的分子机制,为番茄碱的抗胰腺癌作用提供实验依据。本文主要从番茄碱抑制胰腺癌的增殖、迁移及侵袭方面的作用展开研究,共分为以下两个部分:（1）番茄碱通过介导NDRG1抑制胰腺癌生长的实验研究;（2）番茄碱通过抑制TGF-β/Smad信号通路和上皮间质转化抑制胰腺癌细胞迁移和侵袭的实验研究。第一部分番茄碱通过介导NDRG1抑制胰腺癌生长的实验研究目的探究番茄碱对于胰腺癌细胞生长的影响及其可能的作用机制。方法通过MTT、细胞克隆形成,Ed U等实验探索番茄碱对于胰腺癌细胞增殖的影响,通过流式细胞法探究番茄碱对于胰腺癌细胞凋亡和细胞周期的影响,并通过裸鼠皮下成瘤实验探索番茄碱在体内对胰腺癌生长的抑制作用。通过对番茄碱处理前后的胰腺癌细胞的转录组测序,寻找其中的差异表达基因。通过小干扰RNA敲低以及质粒过表达差异基因,探讨其在胰腺癌增殖中的作用。通过q RT-PCR、Western-Blot以及相关细胞功能学实验,探究番茄碱调控差异基因抑制胰腺癌生长的相关分子机制。结果MTT实验、细胞克隆形成实验、Ed U实验发现番茄碱能够显著抑制胰腺癌细胞的增殖;流式细胞法显示番茄碱处理后,胰腺癌细胞凋亡增多,发生细胞周期G0/G1期阻滞,同时Western-Blot实验提示相关凋亡和细胞周期调控蛋白表达改变。裸鼠皮下成瘤实验提示番茄碱在体内对胰腺癌生长具有良好的抑制作用。转录组测序发现在番茄碱处理后胰腺癌细胞NDRG1表达上调,q RT-PCR、Western-Blot实验验证番茄碱能使胰腺癌NDRG1表达升高。细胞功能学实验证实NDRG1敲低能够促进胰腺癌的增殖,NDRG1过表达能够抑制胰腺癌的增殖。同时发现NDRG1敲低能够减弱番茄碱对于胰腺癌增殖的抑制作用,Western-Blot实验提示番茄碱可通过上调NDRG1的表达从而抑制AKT信号通路的激活,抑制胰腺癌生长。结论番茄碱能够抑制胰腺癌细胞的增殖,其可以通过上调NDRG1,引起AKT信号通路的抑制,抑制胰腺癌生长。第二部分番茄碱通过抑制TGF-β/Smad信号通路和上皮间质转化抑制胰腺癌细胞迁移和侵袭的实验研究目的探究番茄碱对于胰腺癌细胞迁移和侵袭的影响,结合TGF-β/Smad信号通路和上皮间质转化揭示其抑制胰腺癌细胞迁移和侵袭的可能分子机制。方法利用非细胞毒性浓度的番茄碱处理胰腺癌细胞,通过细胞划痕实验和Transwell实验检测番茄碱对于胰腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响;通过Western-Blot实验检测TGF-β/Smad信号通路和上皮间质转化相关指标的表达变化情况。结果细胞划痕实验和Transwell实验显示番茄碱对胰腺癌CFPAC-1和MIA Pa Ca-2细胞有明显的抗迁移和侵袭作用。Western-Blot实验显示番茄碱能够通过上调E-cadherin,下调N-cadherin、Vimentin的表达来抑制上皮间质转化。番茄碱能够通过下调p-Smad2和p-Smad3的表达抑制TGF-β/Smad信号通路。此外,番茄碱能够抑制TGF-β1对胰腺癌细胞的促迁移侵袭作用。结论番茄碱能够抑制胰腺癌细胞的迁移和侵袭;其可以通过抑制TGF-β/Smad信号通路和上皮间质转化,发挥抗胰腺癌侵袭转移的作用。