目的:目前已知细胞凋亡和氧化应激与糖尿病肾病（diabetic kidney disease,DKD）的发病机制有关。我们以前曾报道过SLC30家族中的锌离子转运体7（zinc transporter7,Zn T7,SLC30A7）在高糖（high glucose,HG）条件下能够抑制大鼠腹膜间皮细胞的凋亡。此次研究主要探讨SLC30A7是否对于高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡及抗氧化应激有保护作用。实验方法:检测SLC30A7在HG诱导的正常大鼠肾小管上皮细胞系（NRK-52E细胞）和链脲佐菌素（Streptozotocin,STZ）诱导的糖尿病小鼠肾脏中的凋亡中的作用。并进一步利用RT-PCR,si RNA和Western blot分析核因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2,NFE2L2（NFE2））和SLC30A7在此模型中的关系作用。结果:1、糖尿病小鼠肾脏和血清里的锌离子水平有所降低。STZ诱导的糖尿病小鼠与对照组小鼠相比,糖尿病小鼠表现出典型的糖尿病症状,多饮多食尿液增加。随后检测到糖尿病小鼠的尿白蛋白/肌酐比值明显增高。此外,与对照组小鼠相比糖尿病小鼠血清和肾脏中的锌含量略有下降。2、糖尿病小鼠的肾近端小管中都有SLC30A7和NFE2L2的表达。免疫荧光染色检测到SLC30A7表达定位于糖尿病小鼠肾小管近端小管细胞（renal proximal tubular cells,RPTC）的核周区域。随后,我们又用免疫荧光染色对SLC30A7和RPTC的抗水通道蛋白（anti-aquaporin-1,APQ1）进行了共定位,与空白对照组相比,糖尿病小鼠的NFE2L2表达水平升高。3、糖尿病小鼠肾脏中存在肾近端小管细胞的凋亡。利用末端尿苷3’末端标记法检测到糖尿病小鼠的肾近端小管细胞凋亡百分比与对照组相比明显增高。Western blot显示与对照组相比,STZ诱导的糖尿病小鼠肾脏组织内的caspase-3、caspase-9蛋白表达显著增高。4、在高糖诱导的NRK-52E细胞凋亡模型中,细胞内的游离锌和SLC30A7水平存在相关性。我们分别用正常对照组（5.5 mmol/L）和HG（30m M）分别处理24 h,48 h,72 h和96 h后,利用原子吸收分光光度法（atomic absorption spectrophotometry,AAS）法检测NRK-52E细胞内游离锌的水平。与对照组相比,HG处理24h后,我们检测到NRK-52E细胞内的游离锌水平有明显降低。为了进一步了解SLC30A7在NRK-52E细胞内的作用以及阐明在糖尿病肾病（diabetic kidney disease,DKD）肾小管上皮细胞的凋亡机制,我们首先分析了在HG程度下SLC30A7的表达水平。在HG刺激48h后的NRK-52E细胞内SLC30A7的表达水平有明显的增高,为了排除高渗透压这个干扰机制,我们使用甘露醇（44.4m M）来处理SLC30A7,然而SLC30A7的表达水平并没有改变,这证明高渗透压不会影响SLC30A7表达水平。5、SLC30A7对于HG诱导NRK-52E细胞凋亡有保护作用。使用MTT法检测细胞活力,发现HG/SLC30A7/si RNA组的细胞活力低于HG组。利用TUNEL和PI双重染色发现HG/SLC30A7/si RNA组与HG组相比凋亡率明显增加。6、NFE2L2在HG诱导的NRK-52E细胞氧化应激导致的细胞凋亡中有保护意义。用RT-PCR检测HG处理组中NFE2L2和HMOX1 m RNA的表达水平,发现HG处理时NFE2L2和HMOX1 m RNA水平随时间的增加而增加,证明NFE2L2参与了DKD中HG诱导的氧化应激。7、在HG诱导的NRK-52E细胞凋亡模型中,NFE2L2表达减少也降低SLC30A7的表达。我们利用si RNA降低了NFE2L2的表达,转染后,我们利用RT-PCR分别检测24h,48h,72 h和96 h后NFE2L2,HMOX1,和SLC30A7m RNA表达水平,发现NFE2L2,HMOX1,和SLC30A7 m RNA表达水平均有降低。随后,我们又使用HG分别处理24h,48h,72h和96 h,结果表明敲低NFE2L2后会进一步加重HG诱导NRK-52E细胞凋亡。结果表明SLC30A7能够通过激活NFE2L2通路对HG诱导的肾小管上皮细胞凋亡存在一定的保护作用。结论:SLC30A7能够在HG诱导的细胞凋亡过程中通过NFE2L2/HMOX1途径起到一定的抗氧化应激的作用。