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众所周知，人类口腔颌面部恶性肿瘤中以舌癌的发病率居首，而鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma, SCC)是其最常见的病理类型。舌鳞癌患者易发生早期颈淋巴结及晚期远处转移（肺部多见），而区域性淋巴结的恶性转移会严重影响疾病的临床分期、诊治方案以及预后评估。因此，及早明确舌癌患者颈部淋巴结的状况对于确定治疗方案、提高治疗效果十分必要。彩色多普勒是目前临床上检查舌癌患者颈部淋巴结的常用影像学方法之一，应用广泛、成熟，具有操作简便、无创、无辐射等优点，但其诊断的灵敏度及特异度稍差，仍无法满足临床需求。超声微泡（ultrasound microbubbles, UM）是近代超声医学领域的一种新兴产物，近年来发展尤其迅速，其应用原理在于通过改变病变组织、器官的超声特性而增强超声显影的清晰度，从而提高疾病诊断的灵敏性和特异性，现已成为超声医学领域的研究热门。本实验的目的是采用新鲜兔肝VX2小瘤块直接接种于实验兔的舌缘，建立舌癌颈部转移淋巴结的大型动物模型，观察其发生颈部淋巴结转移的规律，选择适宜时机进行颈部不同性质淋巴结的多普勒超声检查及超声微泡造影，完成二者的诊断试验评价，并比较超声微泡造影前、后颈部转移淋巴结超声图像回声强度的差异，评估超声微泡造影在舌癌颈部转移淋巴结诊断中的应用潜能与使用价值。方法1.建立兔舌癌及颈部转移淋巴结的动物模型随机选取新西兰大白兔30只，将大小相近的新鲜兔肝VX2小瘤块接种于实验兔左侧舌缘前1/3的肌层内，严密缝合。将实验兔按瘤块接种后的处死时间随机分为1周组、3周组及5周组（每组10只），定期观察实验兔舌部肿瘤及颈部淋巴结的生长情况及大体形态，切取相应组织进行病理学检查，观察其光镜下的形态学特点，选择适宜的时机进行颈部转移淋巴结的超声检查。2.颈部淋巴结的多普勒超声检查及超声微泡造影随机选取新西兰大白兔20只，于左侧舌缘接种VX2瘤块后严密缝合，建模方法同上。根据上诉实验结果选择适宜的时机进行颈部淋巴结的多普勒超声检查及自制脂质超声微泡造影，观察两种检查方法下不同性质的颈部淋巴结的超声影像学表现，分析反应性及转移性淋巴结的超声图像特点，以病理学诊断结果为“金标准”进行诊断试验评价并绘制ROC曲线。用“DFY型超声图像定量分析诊断仪”测量造影前、后转移淋巴结内的回声强度（echo intensity, EI），比较二者间有无统计学差异。结果1.1周组中8只实验兔舌体可扪及质中偏硬的包块，表面光滑无溃烂，但未扪及颈部肿大淋巴结。3周组中9只实验兔可扪及舌体包块，体积较1周组增大，质地变硬，表面出现溃疡，左侧颈部可扪及肿大质软淋巴结，活动度好。5周组中9只实验兔可扪及舌体质硬包块，体积大，溃烂明显，部分可见舌体缺损，双侧颈部可扪及肿大淋巴结，部分淋巴结质硬，形态不均匀，活动度减小。从病理学检查结果可知：1周组实验兔中，成瘤者(即舌体有肿瘤细胞生长者)共8只，光镜下形态学表现为PDSCC。3周组实验兔中成瘤者9只，左侧颈部解剖出6枚肿大淋巴结，均为反应性淋巴结。5周组实验兔中成瘤者9只，其中7只颈淋巴结内见肿瘤细胞生长（转移率70%），共有25枚颈部肿大淋巴结，13枚为转移灶（均位于颈深区）,12枚为反应性淋巴结。2. VX2瘤块接种5周后，共有19只实验兔成瘤，双侧颈深区共有53枚肿大淋巴结，病理学诊断24枚为反应性淋巴结，29枚为转移性淋巴结。多普勒超声检查诊断26枚形态均匀、皮髓质分界清楚者为反应性淋巴结（5枚误诊），27枚形态不均、结构改变者为疑转移淋巴结（3枚误诊），诊断的灵敏度为83%（24/29），特异度为88%（21/24），ROC曲线下面积为0.851（P<0.01）。超声微泡造影诊断26枚为反应性淋巴结（2枚误诊），表现为造影剂多聚集于淋巴结周围血管内，淋巴结内部无或仅有少量微泡聚集；27枚为疑转移淋巴结，表现为造影剂不均匀地聚集于淋巴结内部，诊断的灵敏度为93%（27/29），特异度为100%（24/24），ROC曲线下面积为0.966（P<0.01）。造影前、后转移淋巴结的EI值分别为38.7±4.18和69.2±4.01，二者间有显著统计学差异（P＜0.01）。结论1. VX2瘤块接种1周后舌体内已有肿瘤细胞生长，5周后实验兔生存状态尚可，且具有较高的颈部淋巴结转移率（转移首先发生于颈深区淋巴结）。实验表明，兔VX2舌鳞癌在生物学行为（如浸润式生长、恶性程度高）及转移特点（如易出现早期转移、转移部位）等多方面与人舌鳞癌高度相似。因此，新鲜兔肝VX2小瘤块接种可成功建立舌癌颈部转移淋巴结的大型动物模型，用以模拟人舌癌颈部淋巴结转移并进行相关实验研究，接种5周时为利用此动物模型的“黄金时间”。2.不同性质的颈部淋巴结具有其特异的超声影像学特点。多普勒超声检查操作简便、无创，超声微泡造影需局部注射造影剂，对机体有轻微损伤，但可增强舌癌颈部转移淋巴结的超声显影，且诊断的灵敏度、特异度及准确度均高于前者，对于颈部淋巴结具有较高的诊断价值及应用潜能，为临床诊断舌癌颈部淋巴结提供了一种可能的新方法。