目的:本研究旨在以间充质干细胞（Mesenchymal stem cells,MSCs）为对象,在体外诱导产生的氧化应激条件下,探讨Nrf2和DKK-1通路对于人间充质干细胞抗体外氧化应激的具体分子机制。方法:选取传代培养至第三代,生长汇合度达60%-70%的人脐带间充质干细胞（Human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs）和人脂肪间充质干细胞（Human adipose-derived stem cells,hADMSCs）为研究对象。同时,采用细菌脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）/双氧水（Hydrogen peroxide solution,H₂O₂）模型,协同诱导体外氧化应激环境。随后分别进行以下实验:（1）采用si RNA转染的方法将Nanog特异性的siRNA转入MSCs中敲低相应基因的表达,24h后在培养液中加入LPS/H₂O₂。第二天,收集细胞检测细胞活性、细胞凋亡、细胞氧化水平相关指标的变化,以研究Nanog基因对MSCs抗氧化压力和抗炎症能力的影响;（2）采用p38 MAPK抑制剂SB203580或ERK1/2抑制剂U0126分别预处理MSCs 2h,随后加入LPS/H₂O₂,继续培养24h,收集细胞检测与细胞活性、细胞凋亡、细胞氧化水平相关指标的变化,以检测MAPK和ERK通路对MSCs抗氧化压力和抗炎症能力的影响;（3）采用lipofectamine 3000转染方法将Nrf2或DKK-1质粒转入MSCs中,48h后加入LPS/H₂O₂,继续培养24h,收集细胞检测与细胞活性、细胞凋亡、细胞氧化水平相关指标的变化,以检测过表达Nrf2或DKK-1对人间充质干细胞抗氧化压力和抗炎症能力的影响。结果:（1）与对照组比较,LPS/H₂O₂处理组人间充质干细胞（hMSCs）活性显著降低（P<0.001）;与LPS/H₂O₂组比较,加入SB203580处理组和敲除Nanog基因组都进一步降低了hMSCs活性（P<0.001）;相反地,与LPS/H₂O₂组比较,加入U0126处理组和过表达Nrf2或DKK1基因组都显著增加了hMSCs活性（P<0.01）。（2）与对照组比较,LPS/H₂O₂处理组h MSCs的细胞凋亡率显著增加（P<0.001）;与LPS/H₂O₂组比较,加入SB203580处理组和敲除Na nog基因组都进一步增加了hMSCs的细胞凋亡率（P<0.05）;相反地,与LPS/H₂O₂组比较,加入U0126处理组和过表达Nrf2或DKK1组都显著降低了hMSCs的细胞凋亡率（P<0.05）。（3）Western blot结果显示,与对照组比较,LPS/H₂O₂处理组的细胞增殖蛋白（PCNA）、抗凋亡蛋白（Bcl-2）表达水平降低,促凋亡蛋白（Bax1）的表达水平增加;与LPS/H₂O₂组比较,加入SB203580处理组或敲除Nanog基因组都进一步降低了hMSCs中PCNA、Bc l-2基因的表达,而增加了Bax1基因的表达;相反地,与LPS/H₂O₂组比较,加入U0126处理组和过表达Nrf2或DKK1组都增加了hMS Cs中PCNA、Bcl-2基因的表达,而降低了Bax1表达。（4）免疫荧光结果显示,与对照组相比,LPS/H₂O₂处理组中h MSCs细胞内的ROS（reactive oxygen species;活性氧）荧光染色剂信号显著增加（P<0.05）;与LPS/H₂O₂组相比,加入SB203580处理组或敲除Nanog基因组都进一步增加了hMSCs中ROS荧光染色剂信号（P<0.05）;相反地,与LPS/H₂O₂处理组相比,加入U0126处理组和过表达Nrf2或DKK1组均显著降低了hMSCs的ROS荧光染色剂信号（P<0.05）。（5）利用MitoSOX在流式细胞术中检测线粒体超氧水平的结果显示,与对照组相比,LPS/H₂O₂处理组中hMSCs的线粒体超氧水平增加;与LPS/H₂O₂组比较,加入SB203580处理组和敲除Nanog基因组都进一步增加了hMSCs中线粒体内的超氧水平;相反地,与LPS/H₂O₂组比较,加入U0126处理组或和过表达Nrf2或DKK1组都降低了h MSCs中线粒体的超氧水平。结论:（1）敲除Nanog基因的表达或抑制MAPK信号通路的传导,将降低hMSCs的抗氧化压力和抗炎症能力;（2）过表达Nrf2或DKK-1基因或抑制MEK/ERK信号通路,可以提高干细胞抗氧化压力和抗炎症能力。（3）Nrf2和DKK-1通路可通过调节抗凋亡基因和促凋亡基因的表达控制细胞的凋亡。（4）hMSCs可通过调控自身MAPK/Nrf2和Nanog/DKK-1通路的变化,调节氧化应激导致的内源性抗氧化酶活性的变化,从而调节细胞的内源性抗氧化水平。