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目的:运用UPLC-MS/MS联用技术建立参芪五味子片化学成分分析方法,并对其化学成分进行分析和表征。以中药血清药物化学的理论和方法对口服参芪五味子片后大鼠血中移行成分进行确认,明确其体内直接作用物质,为参芪五味子片药效物质基础研究提供依据。方法:采用UPLC-MS/MS联用技术平台,分别建立参芪五味子片体外化学成分和大鼠经口服给药后的血中移行成分检测方法。利用 MetaboLynx软件进行数据处理,对参芪五味子片含药血清色谱图的血中移行成分进行了客观的解析及表征。结果:1.参芪五味子片体外化学成分分析利用 UPLC-MS/MS技术建立了参芪五味子片体外化学成分分析方法,一次进样在 17min内完成了参芪五味子片的体外成分的色谱过程,各成分的色谱峰得了良好的分离和检测,共获得 101个色谱峰。通过直观分析,对照品质谱信息的比对并结合高低碰撞能质谱数据的解析,对其中的92个色谱峰表征的化合物进行了结构确定。检测到的化学成分主要包括:五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲、五味子醇乙、襄五脂素、华中五味子酮、党参碱、党参苷Ⅰ、党参苷Ⅴ、黄芪皂苷Ⅰ、黄芪甲苷、斯皮诺素、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B等,主要包括了木脂素类、生物碱类、黄酮类、皂苷类及有机酸类等。2.参芪五味子片体内化学成分分析利用参芪五味子片体外化学成分分析中构建的分析条件,经单次给予健康大鼠参芪五味子片后,血样预处理后,进行色谱分析,于17min完成了对其含药血清UPLC-HDMS/MS色谱图的采集,方中主要入血成分均被良好的分离。基于血清药物化学理论,通过对含药血清、空白血清和体外样品色谱图中各峰的保留时间、二级质谱数据的直观比较分析并结合MetaboLynx数据处理技术,共表征了 41个参芪五味子片血中移行成分,包括3 5个原型入血成分和6个代谢产物。其中来源于南五味子的成分为襄五脂素、华中五味子酮、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素等;来源于党参的成分为 2-[(1-Phenyl-1H-benzimidazol-2-y1)amino]ethanol、党参碱等;来源于黄芪的成分为芒柄花素、黄芪皂苷Ⅰ等;来源于酸枣仁的成分为 N-(2-Methyl-2-propanyl)-4-biphenylcarboxamide、麦珠子酸等。结论:本文以中药血清药物化学理论及方法为指导,利用 UPLC-HDMS/MS技术平台建立了参芪五味子片体外样品及体内血清样品的分析方法,通过MetaboLynx软件进行数据解析,完成了参芪五味子片体内外样品的全扫描MS及MS/MS数据,初步确定大鼠口服参芪五味子片后大鼠血清中的五味子甲素、芒柄花素、华中五味子酮等成分为体内直接作用物质。该实验不但为参芪五味子片后续的药效物质基础研究奠定了基础,更为中药及复方的体内外成分分析提供了可靠、有效的参考模式。