研究背景人双埃可病毒(Human Parechoviruses,HPeVs)是小RNA病毒科(Picornaviridae)双埃可病毒属(Parechovirus)的成员,可导致人的消化系统、呼吸系统甚至神经系统感染。鼠双埃可病毒(Ljungan Virus,LV),也属于双埃可病毒属的一员,其主要宿主是田鼠,但有研究在人血清中检测出其中和抗体。一些小型野生动物如某些种类的鼠、鼩鼱和蝙蝠等常出现在人类居住的环境中,与人接触机会多,有可能成为散播多种疾病的传染源。研究目的了解鼠、鼩鼱和蝙蝠携带HPeVs及LV的情况,为探讨这些动物是否可作为双埃可病毒感染的潜在传染源提供流行病学资料。研究方法1)样本采集2015年9月至2017年6月,在广东省广州市、湖南省益阳市、福建省厦门市,利用捕鼠笼和诱饵诱捕鼠和鼩鼱;2013年11月,在云浮地区捕捉蝙蝠。将捕获的动物经乙醚麻醉后处死并采集其粪便、肝脏、脑组织和咽拭子,分别提取各类标本的总病毒核酸待检。2)种属鉴定利用形态学鉴定方法结合线粒体CytB基因的分子鉴定法确定鼠、鼩鼱或蝙蝠的种属。3)病毒核酸筛查及验证采用巢式PCR对鼠、鼩鼱和蝙蝠标本中HPeV 5’UTR区基因片段进行扩增,筛检阳性样本。利用PCR对样本中LV保守片段进行扩增,检测鼠与鼩鼱标本中LV核酸。4)HPeVs阳性样本中病毒的定量分析使用实时荧光定量PCR(qPCR)的方法测量HPeVs阳性鼠粪便,血清和咽拭子中该病毒的含量。5)分别对鼠与鼩鼱的粪便、血清与咽拭子进行宏病毒组测序。研究结果1)共收集小型野生动物775只,包括鼠421只、鼩鼱108只和蝙蝠246只。2)在421只鼠与108只鼩鼱的肝脏、脑组织和咽拭子标本中均未检测到HPeVs核酸。在246份蝙蝠粪便标本中未检测到HPeVs核酸。3)在421只鼠与108只鼩鼱的粪便、肝脏、脑组织和咽拭子标本中均未检测到LV核酸。4)采用qPCR的方法,发现HPeVs阳性鼠的粪便中病毒含量极低,为1532个拷贝每毫升,其血清中的含量更低,为156个拷贝每毫升。在该鼠的脑组织和咽拭子中均未检测到HPeVs核酸。5)鼠与鼩鼱粪便、血清和咽拭子标本的宏病毒组测序结果表明,虽然小RNA病毒是优势病毒之一,但仅在粪便标本中注释到非常低丰度的双埃可病毒属和HPeVs,且未能在任何标本中注释到LV。研究结论PCR和宏病毒组测序结果提示鼠、鼩鼱和蝙蝠双埃可病毒的携带率或病毒载量极低,本研究未能明确这些动物是否能携带HPeVs和LV,有必要扩大采样规模做进一步研究。