培育节粮瘦肉型转基因猪需要选择生长相关的基因构建表达载体，本研究选取生长激素释放肽Ghrelin基因作为目的基因，其Ghrelin属于生长激素促释放激素受体(GHS-R)的内源性配体，通过与其受体结合，能够促进生长激素(GH)的释放，而且Ghrelin在调节能量平衡、增强胃功能以及增强免疫力方面都呈现出重要的效应。本研究首先从20日龄的长白猪十二指肠组织中提取总RNA，根据Genbank（序列号:DQ355969.1）提供的GhrelincDNA序列，设计带有NheⅠ和HindⅢ酶切位点的引物，采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术，然后将该基因片段重组于无多酶切位点的T载体上，构建pMD-Ghrelin质粒，多次测序，选取克隆完整的DNA片段，用于构建pEGFP-Ghrelin重组质粒。同时利用PCR扩增技术、酶切与电泳及基因测序的方法对重组质粒进行鉴定。然后，pEGFP-Ghrelin重组质粒转染成纤维细胞，观察荧光蛋白的表达。结果如下:　　 1.通过RT-PCR技术获得了Ghrelin的cDNA序列，并应用基因重组技术构建了pEGFP-Ghrelin重组质粒，同时通过PCR扩增和双酶切均得到大小为357bp左右的目的片段，经测序鉴定重组质粒含有完整的Ghrelin的CDS序列片段。　　 2.重组质粒(pEGFP-Ghrelin)转染成纤维细胞，得到表达绿色荧光蛋白的细胞，表明真核表达载体pEGFP-Ghrelin构建成功。