核桃(Juglans regia)胚发育及其营养代谢动态研究

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核桃(Juglans regia)被誉为21世纪的超级食品。本研究以9年生早实核桃品种‘香玲’为试材,运用石蜡制片和半薄切片技术观察了其胚胎发育过程;对其胚营养积累过程中脂肪含量、蛋白质含量、糖含量及其相关酶活性变化动态进行了化学测定;对其胚营养积累过程中脂肪、蛋白质、糖含量的变化和空间的分布特点进行了组织化学分析。结果表明:1)核桃子房为一室,室内具有一直生胚珠,单层珠被,珠孔向上,对着花柱而生且着生在基部胎座上,厚珠心。珠心表皮以内的4-5层细胞中的一个细胞分化为孢原细胞,并直接发育成大孢子母细胞,这是大孢子母细胞的前细胞。大孢子母细胞经过减数分裂形成二分体和四分体,四分体呈线型排列。其中合点端的大孢子直接发育成功能大孢子,其余的三个退化,但退化的先后顺序不规律,此后再经过雌配子体的发育,形成成熟的胚囊,胚囊的发育类型是典型了蓼型。胚的发育经过原胚期、球状胚期、胚器官形成期和胚成熟期4个时期。随着子叶裂瓣顶端分生组织的快速生长充满子房腔,营养积累,种子成熟。2)核桃果实发育过程可划分为:果实缓慢生长期(开花后30d以内)、果实快速生长期(开花后30-60d)、脂肪积累盛期(开花后60-100d)和果实成熟期(开花后100-140d)4个时期。3)核桃胚中脂肪含量是一个持续积累的过程,开花后60-90d是核桃胚中脂肪含量增加最快的时期;开花后100d时,胚中脂肪含量为50.11%,到果实完全成熟时的140d,达到63.13%。而蛋白含量在核桃胚发育过程中波动性较大,总体呈现一个先升高后下降的趋势。核桃胚营养积累过程中葡萄糖和蔗糖含量变化趋势相似,前期含量较低,随后逐渐增加,在花后90d达到最大值,此后逐渐降低;果糖前期含量最高,此后逐渐降低。AI和NI、SS和SPS前期活性较高,而后开始下降,至开花后80d下降到一个低点,而后又开始增加,到开花后90-100d达到高点,随后又开始降低,一直到果实成熟后期达到平衡。可溶性糖与蔗糖、葡萄糖的含量呈显著正相关;蔗糖含量与葡萄糖含量呈极显著正相关,与SS活性、SPS活性呈显著正相关;蛋白质含量与NI活性、AI活性呈负相关,与果糖含量呈极显著负相关。4)通过PAS-考马斯R、PAS-苏丹黑B双重染色,糖被染成紫红色、蛋白质被染成深蓝色、脂肪被染成黑色。组织化学定位显示:核桃胚营养积累过程中,糖多在细胞外围及细胞间分布,糖的分布和脂肪的分布有空间上的相关。脂肪初期积累于细胞外围,逐渐向细胞质内积累,形成大团块的脂体,后期脂体占据整个细胞。蛋白质以蛋白粒的形式散布于细胞质,其数量的变化与化学测定的结果一致。
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