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背景:内毒素休克可致急性肺损伤,严重者可导致急性呼吸窘迫综合症(ARDS)甚至多器官功能衰竭,病死率较高。研究证实,电针刺激足三里和肺俞穴,可减轻内毒素休克所致急性肺损伤。蛋白激酶C(PKC)属于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族,广泛存在于机体的组织细胞内,它包括12种同工酶,PKC-α是其中之一且经常用来作为研究对象。本课题组前期研究发现,Nrf2-ARE通路激活后可使内毒素休克致急性肺损伤减轻。作为Nrf2-ARE通路的下游基因,血红素氧合酶(HO-1)在应激状态下,与其催化产物在机体发挥重要的内源性保护作用。通过对相关文献报道的查阅,我们尚未发现在对内毒素致兔急性肺损伤模型得研究中,有人将电针刺干预与PKC-α-Nrf2/HO-1信号通路的关系进行过阐述。目的:本研究拟通过观察兔内毒素休克致急性肺损伤模型中,不同组别肺组织病理学改变及分子层面各项研究指标表达水平的变化,来明确PKC-α-Nrf2/HO-1通路在电针刺激相关穴位(足三里、内关穴和肺俞穴),干预兔内毒素休克致急性肺损伤中的作用。方法:健康雄性新西兰大白兔80只,2月龄,体重1.5~2.0Kg,采取随机数字表法分为8组(n=10):对照组(C组)、内毒素休克所致急性肺损伤组(L组)、电针刺激穴位+L组(EL组)、电针刺激非穴位+L组(SEL组)、PKC抑制剂白屈菜红碱组(Che组)、二甲基亚砜组(E组)、PKC抑制剂+L组(LC组)、电针刺+PKC抑制剂+L组(ELC组)。EL组、ELC组电针刺激双侧足三里、内关穴和肺俞穴,疏密波,频率2Hz/15Hz,刺激电流1~2mA,波宽0.2~0.6ms,刺激强度以兔肢体出现与电针频率一致的轻微颤动为宜,1次/d,30min/次,连续5d;SEL组电针刺激足三里、内关穴和肺俞穴旁开0.5cm非经非穴处,针刺参数同EL组。实验当日,电针刺贯穿整个实验过程。实验开始后,按实验组别分别进行处理。Che组及LC组经耳缘静脉注射白屈菜红碱5mg/kg(溶于0.5ml0.1%二甲基亚砜),E组静脉注射0.1%二甲基亚砜0.5ml,其余组给予等容量的生理盐水;30分钟后L组、EL组、SEL组、LC组及ELC组经兔耳缘静脉给予LPS5mg/kg(溶于2ml生理盐水),其余组给予等容量的生理盐水。以注射LPS2h内平均动脉压下降≥基础值的25%为模型制备成功。兔耳缘静脉静脉注射LPS或生理盐水后6h时,取颈总动脉血行血气分析后处死大白兔,取肺组织,进行病理学观察及肺损伤评分,计算肺组织湿/干重比(W/D),测定肺组织匀浆中MDA含量及SOD活性,检测Nrf2mRNA、HO-1mRNA、HO-1蛋白、Nrf2核蛋白和总蛋白以及PKC-α蛋白表达水平。结果:与C组相比,L组、EL组、SEL组、LC组及ELC组SOD活性活性降低,肺组织病理学评分、W/D、MDA含量升高,Nrf2 mRNA、HO-1mRNA、HO-1蛋白、PKC-α蛋白及Nrf2核蛋白和总蛋白表达上调(P<0.05),Che组、E组上述各指标差异无统计学意义(P>0.05);与L组相比,EL组肺组织病理学评分、W/D、MDA含量降低,SOD活性升高,Nrf2mRNA、HO-1mRNA、HO-1蛋白、PKC-α、Nrf2核蛋白及总蛋白表达上调(P<0.05),LC组、ELC组肺组织病理学评分、W/D、MDA含量升高,SOD活性下降,Nrf2mRNA、HO-1mRNA、HO-1蛋白、PKC-α蛋白及Nrf2核蛋白和总蛋白表达下调(P<0.05),SEL组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与EL组相比,SEL组、ELC组肺组织病理学评分、W/D、MDA含量升高,SOD活性降低,Nrf2mRNA、HO-1mRNA、HO-1蛋白、PKC-α蛋白及Nrf2核蛋白和总蛋白表达下调(P<0.05);与LC组相比,ELC组肺组织病理学评分、W/D、MDA含量降低,SOD活性升高,Nrf2mRNA、HO-1mRNA、HO-1蛋白、PKC-α蛋白及Nrf2核蛋白和总蛋白表达上调(P<0.05)。结论:电针刺干预兔内毒素休克肺损伤中,可通过PKC-α-Nrf2/HO-1通路的激活改善肺损伤程度,进而发挥肺保护作用。