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实验目的:目前,体内外实验研究已经证实了许多miRNA和靶基因之间存在着抑制信息通路,而靶基因多数为癌症相关基因。PDCD10(程序性细胞死亡因子10)是凋亡相关因子,调控细胞凋亡,最近一些研究表明,其与肿瘤的增殖、血管形成有关。PDCD10在非小细胞肺癌中,尤其在低分化肺癌中呈高表达。已经有研究证实在前列腺癌中miRNA-103通过抑制PDCD10的表达从而达到抑制肿瘤的作用。研究miRNA-103是否通过靶向调节PDCD10而发挥抑制肿瘤的作用,我们观察miRNA-103过表达或PDCD10基因沉默对非小细胞肺癌增值和侵袭能力的影响。本研究的目的是在非小细胞肺癌中miRNA-103是否也通过抑制PDCD10表达而达到抑制肿瘤的作用。实验方法:使用逆转录实时定量PCR检测32对人非小细胞肺癌组织及相应的癌旁正常组织中miRNA-103和PDCD10 m RNA的表达情况,并检测A549、SPCA1、H1299、NCI-4460、PC9、16HBE细胞中miRNA-103和PDCD10的表达。运用多个高通量数据库对miRNA-103的靶基因进行筛选,PDCD10为其中靶基因之一。将miRNA-103 mimics、negative control mimic(NC)、miRNA-103 inhibitor、pc DNA3.1 PDCD10或者negative control siRNA(pc DNA3.1)转染A549细胞,检测PDCD10的表达。Transwell实验研究结果体现出相应的结论,即103-mi R具备降低A549细胞活力的属性,能够有效地妨碍癌细胞的转移和破坏。下调mi R-103能够显著降低程序性细胞死亡蛋白10(PDCD10)的水平。将mi R-103mimic和p GL3-PDCD10 WT 3’-UTR共转染至A549细胞,我们检测到荧光素酶的活性显著下降,而在mi R-103 mimic和p GL3-PDCD10 mut 3’-UTR共转染的A549细胞中荧光素酶活性不变。过表达PDCD10可以显著逆转NSCLC组织和细胞中mi R-103介导的促凋亡作用。实验结果:在人的非小细胞肺癌组织细胞中,miRNA-103的低表达和PDCD10的高表达显著相关。PDCD10蛋白在非小细胞肺癌组织中表达升高。转染miRNA-103 mimics抑制PDCD10的表达。miRNA-103 mimics显著抑制含wt PDCD10-3’UTR的质粒的荧光素酶活性,却没有影响含mut PDCD10-3’UTR的质粒的荧光素酶活性,这说明miRNA-103直接结合并作用于PDCD10-3’UTR的相应预测靶位点。增强miRNA-103表达或siRNA介导的PDCD10基因沉默均能显著减弱肺癌细胞增殖和侵袭能力。实验结论:miRNA-103对PDCD10 m RNA翻译产物的作用的负调控的。增强miRNA-103表达或siRNA介导的PDCD10基因沉默均能显著减弱肺癌细胞增殖和侵袭能力。