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Bikunin是一种含硫酸软骨素糖链的血浆糖蛋白，在肝脏中合成，由肾脏代谢后随尿液排出。研究发现，Bikunin可显著抑制胰蛋白酶，纤溶酶，糜蛋白酶和组织蛋白酶等多种蛋白酶的活性，并能抑制促炎细胞因子的产生，在急性胰腺炎，急性循环衰竭等疾病的治疗中有着广泛的应用。目前市售的Bikunin制剂（乌司他丁）是从人尿中提纯获得，其半衰期较短，且受尿液来源限制，并存在安全隐患及纯化困难等问题，限制了其临床应用。因此，探寻获取高胰酶抑制活性、长半衰期Bikunin的制备方法已成为当前Bikunin的研究热点。Nanobody是克隆骆驼血清中重链抗体可变区而获得的特殊抗体，它保留了原始抗体的抗原表位高结合能力。研究证明，将抗人血清白蛋白nanobody（aAlb）与其他药物偶联或融合使用，可以显著延长该药物在血液中的半衰期，进而成为解决Bikunin半衰期问题的有效方法之一。本课题中，我们利用基因工程手段在CHO细胞中表达了一种全新的aAlb-Bikunin融合蛋白，并最终通过Ni2+金属螯和层析纯化获得目的蛋白。蛋白印迹分析表明目的蛋白分子量约为40kD，并能特异性结合人血清白蛋白及抗Bikunin抗体。通过表面共振技术测得目的蛋白与人和小鼠血清白蛋白亲和力分别为3.93×10-8M和4.86×10-8M。体外胰酶抑制试验测得此融合蛋白比活性高达5800IU/mg，且其在动物体内半衰期长达6h。此研究首次应用抗人血清白蛋白Nanobody与Bikunin融合表达，获得了活性高且半衰期长的新型重组Bikunin，克服了Bikunin半衰期短、提纯困难的缺点。而aAlb-Bikunin不仅在研究上为药物半衰期的延长提供了一种确实有效的解决方案，同时在急性胰腺炎、急性循环衰竭等疾病的治疗上具有一定的应用价值和临床前景。