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近年来,随着灵芝人工养殖面积的逐步扩大,人们越来越关注于灵芝相关产品的开发和研究。但目前,灵芝中功能成分的研究不够完善,一些有效活性成分没有得到充分利用,易造成灵芝资源的浪费。因此,本论文以山东冠县人工培育的南韩灵芝作为原料,探究其中的活性成分——灵芝三萜类化合物,通过实验提高其得率,并对灵芝三萜进行了初步分离纯化和鉴定,研究了其抗氧化活性。本论文主要通过对比不同提取方法,利用响应面优化设计,得出灵芝三萜的最优提取工艺条件。利用大孔树脂,对粗提取液进行分离纯化,通过筛选大孔树脂、静态及动态吸附动力学实验,摸索分离纯化灵芝三萜的洗脱条件。另外,对灵芝三萜类化合物进行了进一步分析,改进了高效液相色谱条件,并串联质谱法对灵芝三萜类物质进行了初步鉴定。最后,对比不同提取方法所得灵芝三萜提取液,进行抗氧化活性研究。本论文的主要研究成果:1.首次采用超高压辅助的方法提取灵芝中的三萜类物质,并与传统浸提方法、超声辅助提取方法进行了比较,通过对工艺条件进行响应面优化设计,发现超高压辅助提取所得灵芝三萜得率最高,提取时间最短。最佳工艺条件为:料液比1:26g/mL,乙醇浓度96%,设定压力为295 MPa,温度为40℃,时间为5 min,预测灵芝三萜最大得率为1.3200%。2.利用大孔树脂将超高压辅助提取得到的灵芝三萜粗提液进行分离纯化,在筛选大孔树脂、静态和动态吸附动力学实验的基础上,得出最优条件为:大孔树脂型号为AB-8,上样量30 mL,保持流速为2 BV/h,pH为4,按蒸馏水、乙醇浓度依次为15%、35%、95%的顺序进行洗脱。3.考察高效液相色谱技术分离灵芝三萜的色谱条件,最终选择流动相为乙腈-水。通过液相色谱-质谱法综合分析灵芝中的三萜类成分,初步推测提取液中含灵芝酸类三萜成分。4.考察灵芝中三萜类成分的体外抗氧化实验,以DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基的清除率和铁离子还原力为依据,对照Vc和BHT,判定抗氧化能力。超高压辅助方法提取所得灵芝三萜体外抗氧化能力优于其他两种方法,高浓度的灵芝三萜体外抗氧化能力高于低浓度,展现出一定强度的抗氧化性。