黄芩素通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制人胶质母细胞瘤细胞MGMT表达

来源 :上海交通大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liyang3d
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
背景和目的:胶质母细胞瘤是一种恶性程度极高、预后极差的颅内原发性星形细胞肿瘤。替莫唑胺作为当前一线术后化疗药物对MGMT表达阳性的胶质母细胞瘤患者疗效甚微,这一现象与MGMT阳性造成的替莫唑胺化疗耐药密切相关。本课题研究中药单体黄芩素体外实验中对人胶质母细胞瘤T98G、GBM-X细胞MGMT蛋白表达的抑制作用,并探讨相关的信号通路机制。实验方法:通过查阅文献框选出可能抑制肿瘤生长,影响胶质母细胞瘤细胞MGMT表达的18种中药单体,通过蛋白质免疫印迹法(Western blotting,Western Blot)初步筛选出对胶质母细胞瘤细胞MGMT蛋白抑制最为显著的中药单体即黄芩素,从课题组已购买的细胞系和已培育的原代细胞中筛选MGMT高表达阳性的细胞即T98G、GBM-X细胞。通过蛋白质免疫印迹法(Western blotting,Western Blot)检测黄芩素作用72h后MGMT蛋白及相关信号通路蛋白的表达水平,通过细胞免疫荧光染色(Immunofluorescence technique)观察MGMT蛋白在胶质母细胞瘤细胞中的定位,利用反转录聚合酶链式反应(Reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测MGMT mRNA表达水平,采用细胞增殖/毒性检测(Cell Counting Kit-8,CCK-8)试验检测黄芩素、替莫唑胺以及替莫唑胺联合黄芩素对T98G、GBM-X的细胞毒作用,探讨联合用药治疗MGMT阳性胶质母细胞瘤的可能性。实验结果:常氧/缺氧条件下,T98G细胞黄芩素药物处理组(0.757±0.058,0.714±0.049)MGMT蛋白表达水平较对照组(1.000±0.101,1.000±0.072)显著下降(P<0.05,P<0.01),GBM-X细胞处理组(0.843±0.027,0.697±0.052)MGMT表达水平较对照组(1.000±0.031,1.000±0.082)显著降低(P<0.01,P<0.01)。T98G、GBM-X细胞经黄芩素药物作用后TCF1/TCF7(T细胞因子)、LEF1(淋巴增强因子)、Survivin(生存素)蛋白表达水平与各对照组相比显著下降,差异有统计学意义。细胞免疫荧光染色结果显示MGMT蛋白主要表达于胶质母细胞瘤细胞核内,且药物作用不影响MGMT蛋白的细胞内定位。CCK-8试验检测吸光度值,发现T98G、GBM-X细胞经药物作用24h、48h、72h后,替莫唑胺组与对照组相比细胞增殖无明显统计学差异,替莫唑胺联合黄芩素组吸光度值较各自对照组显著下降,差异有统计学意义。实验结论:MGMT蛋白主要表达于胶质母细胞瘤细胞核内,黄芩素可稳定抑制MGMT蛋白表达,不改变MGMT蛋白的细胞内定位。替莫唑胺对MGMT表达阳性的胶质母细胞瘤细胞无明显杀伤作用,但联合黄芩素可逆转胶质母细胞瘤细胞替莫唑胺耐药现象,显著增强替莫唑胺的细胞毒作用。黄芩素抑制MGMT蛋白表达不影响MGMT mRNA水平。MGMT蛋白表达下降与上游TCF/LEF蛋白下降有关,并可导致Survivin蛋白表达下降,因而与Wnt/β-catenin/MGMT/Survivin信号通路表达异常关联密切。
其他文献
商标是由多种元素构成的指示商品或服务来源的符号,其中有些元素除组成商标外,在公共领域中还承担着描述质量、地理来源等商品特征的功能,这些功能并不因为商标注册而丧失。为了维护商标中这类元素的原始功能,美国、欧盟、英国等国家或者地区在商标立法中都陆续规定了商标的正当使用制度。我国在《商标法》第59条中也对地名等描述性词汇的正当使用进行了规定。然而,我国在商标正当使用,特别是关于地名商标正当使用制度的理论
1898年美西战争后,美国占领菲律宾,从此开始了两国军事关系的交往和发展。新世纪以来,菲美军事关系的发展经历了升温、强化、调整三个阶段,在菲律宾三任总统执政期间,两国军
《职业女性》由现任美国总统唐纳德·特朗普之女——伊万卡·特朗普(Ivanka Trump)结合亲身创业经历写就。在该书中,她讲述了当代职场女性面临的窘境。《职业女性》在篇章组
伊春林区劳动号子是伊春市唯一的国家级非物质文化遗产保护项目,引起了社会上越来越多人的关注。伊春林区劳动号子的传承和发展需要其赖以生存的社会环境和文化土壤。随着林
国族(方国部族)是商代甲骨文、青铜器铭文以及考古学文化研究等都要涉及的问题。在甲骨学的基础研究方面,对不同组类国族材料的系统整理,是其难点之一。殷人信奉鬼神,崇尚占
近年来,中职学校专业教师素质的提升成为制约中职教育质量提升和教育改革推进的重要影响因素。教师到企业去经历具体实践工作和增加一线的生产经验,对提升职业院校教师“双师
国内关于被遗忘权的热议,起源于“任甲玉诉北京网讯科技有限公司”一案,在该案件中任甲玉关于被遗忘权的诉讼请求因“不符合利益正当性和保护必要性”而没有获得支持。其实国外早就有关于被遗忘权的案子,例如冈萨雷斯诉西班牙谷歌公司案。在该案件中,欧盟法院却支持了冈萨雷斯要求谷歌公司删除相关链接的申请。就连美国加利福尼亚州也颁布了“橡皮擦法案”,允许本州境内的未成年人擦除自己在社交网站上的上网痕迹。在这些案例中
笔者旨在通过对感觉、逻辑、形式、感觉的逻辑和逻辑的感觉等方面来进行梳理和解释,来指出绘画创作中所遇到的一些困难,并试图结合吉尔·德勒兹(Gilles Louis RénéDeleuze)
目的:初步探索免疫蛋白酶体在胶质瘤组织中的表达水平及其与胶质瘤患者临床病理因素和预后的关系;进一步研究蛋白酶体抑制剂ONX0912对胶质瘤细胞的作用和分子机制。方法:应用
目的:谵妄被定义为急性短暂性器质性脑综合征,它并不是指的某一种疾病,而是一种临床综合征,指患者在术后数日内表现出认知能力下降及注意力缺损等症状。到目前为止,谵妄的发病机制尚不明确,对于其危险因素也没有确切的结论。本课题拟通过研究年龄、性别、低血氧症、气道管理方式及是否输血与口腔颌面部恶性肿瘤游离皮瓣移植修复术后谵妄的关系,为预防和降低术后谵妄的发生提供理论依据,并在出现术后谵妄时给予积极治疗,并最