本研究用能在p53异常的肿瘤内选择性增殖的腺病毒携带小鼠白细胞介素12（mIL12）基因，增强对p53异常的鼻咽癌细胞杀伤作用。 首先采用PCR技术构建了由mIL12二个亚基基因组成的单链mIL12融合基因，将它插入腺病毒载体质粒CNHK200，构建为质粒CNHK200-mIL12，与腺病毒载体质粒PBGHE3共转染293细胞，重组携带mIL12融合基因的E1B-55Kda蛋白缺失的腺病毒CNHK200-mIL12，用CNHK200-mIL12感染人鼻咽癌细胞株CNE3和915后72小时，ELISA夹心法测定mIL12表达量，结果显示CNE3细胞中表达量达到84ng/10~5PFU/10~4细胞，915细胞中表达量达到75ng/10~5PFU/10~4细胞。 电镜观察可见CNHK200-mIL12在CNE3中大量复制的病毒颗粒，直接免疫组化染色和流式细胞仪检测CNHK200-mIL12感染CNE3和915后细胞中腺病毒六联体蛋白为阳性，CNHK200-mIL12感染CNE3和915后0小时，六联体蛋白阳性率分别为17％和19％，24小时后增高到42％和23％，表明CNHK200-mIL12在CNE3和915内复制。TCID50法测定CNHK200-mIL12在CNE3和915中复制增殖率，72小时后均超过1000倍。以MOI=10的CNHK200-mIL12感染CNE3和915后7天，台盼蓝染色后细胞计数结果显示杀伤细胞率分别为85％和64％。与E1B-55Kda蛋白缺失的肿瘤选择性增殖腺病毒dl1520比较，对CNE3和915的感染、增殖和杀伤能力没有明显差异，表明在选择性增殖腺病毒内插入mIL12基因没有影响其功能。 应用CNHK200-mIL12和dl1520对裸鼠皮下接种的CNE3形成的移植瘤进行肿瘤内注射治疗。用CNHK200-mIL12瘤内注射后肿瘤缩小，显著高于dl152O治疗组（P＜0.05）。 本研究表明CNHK200-mIL12具有dl1520相同功能，而且携带mIL12能够增强病毒对肿瘤细胞的杀伤作用。这种选择性增殖腺病毒能携带IL12基因靶向肿瘤细胞，使几 12只在肿瘤细胞中选择性表达，减少 IL全身应用的毒副作用，为进一步研究选择性增殖腺病毒携带各种抗瘤因子用于临床基因治疗提供一种新的方法。