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目的:新疆阿勒泰地区哈萨克族传统发酵乳制品中蕴含有丰富的天然益生菌种质资源,通过对这些发酵乳制品中的乳酸菌进行分离鉴定,不仅可以挖掘和保护我国特有的乳酸菌种质资源,而且可以丰富我国的乳制品工业用菌,建立我国自主的乳酸菌菌种资源库。 方法:本实验通过对采自新疆阿勒泰地区哈萨克族传统发酵乳制品中的乳酸菌进行分离,通过生理生化特性和16SrDNA序列同源性分析对其进行鉴定。对分离菌株进行耐酸性研究,旨在筛选出耐酸性强的菌株。并对其发酵过程中产酸能力和后产酸能力进行研究,筛选出性能较好的菌株。采用牛津杯法研究乳酸菌的抑菌性。最后通过纸片法和微量法对分离菌株的药敏性进行了初步研究。 结论: 1、从新疆阿勒泰传统乳制品中共分离得到28株乳酸菌,通过生理生化和16SrDNA序列同源性分析将28株乳酸菌分为三个属,即乳杆菌属(Lactobacillus)、肠球菌属(Enterococcus)、魏斯氏菌属(Weissella)。分离得到的乳酸杆菌大部分属于瑞士乳杆菌(Lactobacillus.helveticus)和干酪乳杆菌(Lactobacillus.casei)。分离得到的乳酸菌大部分可在15℃下不生长,而在45℃下可以生长。菌株的耐钠盐和胆盐的耐受性较好。 2、对分离菌株的耐酸性研究表明,菌株NS1-3具有较强耐酸性,在试验设定的pH范围内均有所生长。只是生长幅度随pH值的降低而降低,在极限pH1.5仍能生长,表明这株菌具有良好的耐酸性。 3、乳酸菌产酸能力和后产酸能力的研究表明,菌株的产酸能力均很强,大部分菌株在发酵24h后酸度值均在100oT以上。且菌株TY1-a、Y5-4和Y1-2具有很好的抗后酸化能力,保证了酸乳在贮存过程中的稳定性,可以作为生产菌株。 4、乳酸菌抑菌特性的研究结果表明,初筛时大部分乳酸菌对大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aerugonosa)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)这5株指示菌分别有抑菌效果,其中1株干酪乳杆菌(TNG2)和4株瑞士乳杆菌(NS2-a,TNS1-1,NS1-1和NS2-1)对5株指示菌均有抑菌效果。在排除酸、过氧化氢等干扰因素之后,得到2株有明显抑菌代谢产物的菌株。其中Y1-1(Lactobacillus casei)对铜绿假单胞杆菌(G+)有较好的抑菌效果,TY1-2(Lactobacillus helveticus)对铜绿假单胞杆菌(G+)和枯草芽孢杆菌(G+)均有抑菌效果。 5、乳酸菌耐药性的研究结果表明,所有菌株对氨苄西林,头孢噻亏,氯霉素,红霉素,庆大霉素,青霉素,利福平,四环素,万古霉素的耐药率分别为32.1%,28.6%,21.4%,0,67.9%,57.1%,17.9%,21.4%和53.6%。