论文部分内容阅读
目的:在中医学病证结合的细胞模型基础上,通过建立颈性眩晕(Cervicalvertigo,CV)血瘀证的血管内皮细胞损伤模型,实施体外压力刺激模拟推拿,最终建立起一个具有中医“病证结合”特点的推拿手法对细胞的力学加载模型(病证结合细胞推拿模型);通过不同压力刺激强度及丹参酮ⅡA(TanⅡA)对血清诱导的细胞损伤模型干预的对比研究,探究模拟推拿的体外压力刺激对颈性眩晕血瘀证细胞损伤模型的活血化瘀效应。方法:选择符合纳入标准的颈性眩晕血瘀证、非血瘀证患者及健康志愿者各30例为研究对象,处理后取其含体积分数为10%血清培养液,损伤对数期生长人脐静脉内皮细胞株(CRL-1730),设置空白对照组比较其细胞形态活性、内分泌功能、细胞内游离钙浓度及细胞损伤标志物指标;采用细胞力学加载实验以模拟推拿一维力学手法,基于预实验基础上设置零、低、高强度的压力刺激,将压力刺激组(包括CV血瘀证1组、CV非血瘀证1组、健康1组、空白对照1组)细胞置于压力装置中,然后移入37℃含5%CO2孵箱中,然后和非压力刺激组进行对比,与此同时进行药物反证实验,通过丹参酮ⅡA(TanⅡA)分别对实验组和对照组内皮细胞进行干预实验,测量各项指标。结果:1)颈性眩晕血瘀证组与健康组对比,其血瘀对照组与健康对照组,在细胞形态上差异明显,而在细胞活性、细胞内钙离子浓度、NO、ET、IL-1β含量及内皮损伤标志物vWF、TM、EPCR的含量比较上,差异具有统计学意义(P<0.05),血瘀证对照组的细胞形态、活性、内分泌功能均下降,损伤标志物vWF、TM、EPCR含量明显上升;2)与颈性眩晕血瘀证对照组相比,该组压力组与加药组细胞形态变化不甚明显,而在细胞活性、细胞内钙离子浓度、NO、ET含量比值、IL-1β及内皮损伤标志物vWF、TM、EPCR含量的比较上,差异具有统计学意义(P<0.05),且压力刺激下细胞形态、活性、内分泌功能均上升,损伤标志物vWF、TM、EPCRvWF、TM、EPCR含量明显下降;3)颈性眩晕血瘀低压组与颈性眩晕血瘀高压组、药物组相比,低压组与加药组细胞形态变化不甚明显,而在细胞活性、细胞内钙离子浓度、NO、ET含量比值、IL-1β及内皮损伤标志物vWF、TM、EPCR含量的比较上,差异具有统计学意义(P<0.05),可以有效增加细胞活性、内分泌功能,减少细胞损伤标志物vWF、TM、EPCR含量,其中低压组效果最佳,甚于加药组。结论:颈性眩晕血瘀证患者血清干预人脐静脉内皮细胞可以建立颈性眩晕血瘀证模型;通过一维压力刺激模拟推拿作用该模型,可以有效减轻细胞的损伤,对内皮细胞起到一定的保护作用;其中低压力刺激作用效果优于高压力刺激,在药物反证中,进一步证明了压力刺激的活血化瘀效应。