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目的:探讨urotensin Ⅱ(UⅡ)/UT系统对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激枯否细胞(Kupffer cell,KC)固有免疫炎症信号通路Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)-干扰素调节因子3(Interferon regulatory factor 3,IRF3)的影响。方法:采用在体原位灌注、密度梯度离心和早期细胞换液等方法分离纯化大鼠KC,并采用墨汁吞噬和ED2染色试验对分离培养的细胞进行鉴定。采用LPS刺激肝KC。将细胞按照随机数字表的方法随机分成6组,各组细胞处置方法如下:A组:UⅡ(-)urantide(-)LPS(-);B组:UⅡ(+)urantide(-)LPS(-);C组:UⅡ(-)urantide(+)LPS(-);D组:UⅡ(-)urantide(-)LPS(+);E组:UⅡ(+)urantide(-)LPS(+);F组:UⅡ(-)urantide(+)LPS(+)。KC培养上清液促炎性细胞因子IL-6、IFN-β和IFN-γ分泌水平采用ELISA分析检测,细胞表面TLR4的表达采用流式细胞技术分析,IRF3基因和蛋白表达情况分别采用real-time PCR和Western blot分析方法检测。结果:成功分离和纯化大鼠肝KC,并经墨汁吞噬和ED2染色试验鉴定证实。经统计学处理,ELISA检测细胞上清液前炎细胞因子IL-6、IFN-β和IFN-γ分泌水平显示,D组和E组较A组、B组和C组均显著升高,而F组较D和E组显著降低(均P﹤0.001)。D和E两组间以及A、B和C三组间上述细胞因子水平均无明显统计学差异(均P>0.05)。TLR4阳性细胞率经统计学处理后显示,D组和E组较A、B和C组显著增高(均P<0.001),而F组较D和E组显著降低(均P<0.001)。D和E两组间以及A、B和C三组之间TLR4阳性细胞率差异均无明显统计学意义(均P>0.05)。IRF3 mRNA相对表达水平D组和E组比A组、B组、C组显著升高(均P﹤0.001),F组较D组和E组显著下降(均P﹤0.001),D和E两组间以及A、B和C三组间IRF3 mRNA相对表达量的差异无明显统计学意义(均P>0.05)。细胞浆中IRF3蛋白的相对表达水平D和E组较A、B和C组显著下调(均P﹤0.001),F组较D和E组明显上调(均P﹤0.001),而D和E两组间以及A、B和C三组间胞浆IRF3蛋白水平差异均无明显统计学意义(均P>0.05);另外,细胞核内IRF3蛋白的相对表达水平D和E组较A、B和C组显著上调(均P﹤0.001),F组较D和E组显著下调(均P﹤0.001),而D和E两组间以及A、B和C三组间胞核IRF3蛋白水平均无明显统计学差异(均P>0.05)。结论:LPS刺激可诱导KC对IL-6、IFN-β和IFN-γ细胞因子分泌,诱导细胞表达TLR4和IRF3,并促进IRF3蛋白核转位。UT拮抗剂urantide能抑制上述LPS的刺激效应。因此,UⅡ/UT系统通过对TLR4-IRF3通路的正性调控作用,介导了或至少部分介导了LPS刺激KC的免疫性炎症分泌效应。