中国落叶松-杨栅锈菌SSR遗传多样性分析及特异性DNA标记开发

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落叶松-杨栅锈菌(Melampsora larici-populina,简称MLP)是一种在世界范围内广泛传播并产生严重危害的转主寄生真菌,主要分布在我国西北、东北、华北等地区,危害青杨派、黑杨派及其杂交种等多种杨树。该菌繁殖速度快,群体数量大,致病性变异频率高,遗传现象复杂。为深入了解该菌群体分化现状,本研究利用微卫星(SSR)分子标记对63个落叶松-杨栅锈菌菌系进行遗传多样性分析,主要研究结果如下:  (1)从27对引物中筛选出了10对多态性较好的引物,共检测到98个等位基因,其中MLP4、MLP12、MLP43引物分别检测到13个等位基因,MLP57检测到6个等位基因。平均观察等位基因数(Na)9.8000,平均有效等位基因(Ne)5.9878。菌系总体遗传多样性较高,基因型丰富,平均观测杂合度0.4109,平均期望杂合度0.8267,10个位点中有7个近交系数为正值,亲代群体的杂合体数目偏少,整体纯合体偏多。  (2)11个MLP菌群间平均遗传分化系数(Fst)为0.3505,遗传分化的水平总体较高,群体间的基因型多样。菌系群体间平均基因流0.4634,有8个位点基因流Nm<1,表明基因流受到部分阻碍。不同地区菌群遗传多样性存在差异,Shannon’s多样性指数(I)最低的是江苏菌群(Pop11)为0.2971,最高是秦岭火地塘菌群(Pop3)为1.7332。  (3)基于Neis遗传距离构建的UPGMA聚类树将11个地理群划分为6个类群,秦岭火地塘菌群为其他地理群的基部群。63个菌系的UPGMA聚类显示,落叶松-杨栅锈菌群体分化和菌系地理来源相关。关中菌群可能来源于秦岭天台山菌系,四川菌群来源于秦岭厚畛子,其他复合菌群可能源自杨树种苗调运,但都和秦岭菌系有关系。  (4)筛选并克隆了陕西关中菌群所在类群(Group5)和秦岭火地塘菌群所在类群(Group6)的特异性DNA片段,将其开发为共显性标记,并对灵敏性进行测定,检测的DNA最低浓度为5ng/μL,该研究为区别两地菌群、并监测该地区菌系的分布、变异、流行特征奠定了基础。
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