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目的：膜联蛋白a2 (Annexin a2)是一种钙离子依赖的磷脂结合蛋白,在肿瘤细胞中广泛高表达,是肿瘤细胞和正常组织细胞表达水平明显差异的蛋白质之一。信号转导和转录激活因子3(STAT3)具有信号转导和转录激活双重功能,在人类多种恶性肿瘤中高表达,调节与增殖、侵袭相关的蛋白质c-Myc、cyclin D1、MMP-2和MMP-9等蛋白质的表达水平,因此其过度表达与肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭等密切相关。本研究应用RNA干扰技术降低乳腺癌细胞中Annexin a2的表达水平,探讨其对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,并研究其与STAT3是否存在相互作用,进一步探索Annexin a2调节乳腺癌细胞增殖、侵袭和转移的机制。方法：1.应用RNA干扰技术降低人乳腺癌MDA-MB-231细胞中Annexin a2蛋白的表达水平,并用Western blotting技术验证其表达水平。2.采用MTT实验检测Annexin a2降表达对MDA-MB-231细胞增殖能力的影响。3.用克隆形成实验检测抑制Annexin a2基因沉默对MDA-MB-231细胞克隆形成能力的影响。4.用流式细胞仪检测Annexin a2表达水平下降后MDA-MB-231细胞周期分布的改变。5.划痕实验检测Annexin a2表达水平下降对MDA-MB-231细胞的迁移能力影响。6.采用体外侵袭实验检测Annexin a2降表达对MDA-MB-231细胞的浸润能力的影响。7.免疫共沉淀技术检测与Annexin a2相互作用的蛋白质,并采用免疫荧光技术检测Annexin a2与相互作用的蛋白质在细胞内的定位。8.用Western blotting技术检测Annexin a2降表达后与增殖有关的蛋白c-Myc、cyclin D1、MMP-2和MMP-9的表达水平,进一步明确Annexin a2调控乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制。结果：1.应用RNA干扰技术转染人乳腺癌细胞MDA-MB-231后筛选得到Annexin a2蛋白表达水平下降80%-100%的3株单克隆细胞。2. Annexin a2表达水平下降后MDA-MB-231细胞增殖能力明显减弱(P<0.05)。3. Annexin a2基因沉默后MDA-MB-231细胞克隆形成能力显著降低(P<0.05)。4. Annexin a2表达水平下降导致MDA-MB-231细胞的增殖指数下降,细胞周期G1期比例升高,G2/M+S期比例明显下降(P<0.05)。5.划痕实验发现Annexin a2降表达后乳腺癌MDA-MB-231细胞的迁移能力显著下降(P<0.05)。6.体外侵袭实验结果表明Annexin a2降表达后细胞的体外侵袭能力明显下降(P<0.05)。7.免疫共沉淀技术发现Annexin a2与信号转导和转录激活因子3(STAT3)存在相互作用。8. Western blotting技术检测发现Annexin a2基因沉默后c-Myc、cyclin D1MMP-2和MMP-9的表达水平明显下降。结论：1.免疫沉淀检测MDA-MB-231细胞中与Annexin a2目互作用的蛋白质发现其与STAT3存在相互作用；免疫荧光检测发现在MDA-MB-231田胞中Annexina2与STAT3主要定位于胞浆。2. Annexin a2的表达水平下降后MDA-MB-231细胞的增殖能力和克隆形成能力降低,细胞增殖指数下降,细胞周期分布G1期比例增高,G2/M+S期比例明显下降。Annexin a2表达水平下降后c-Myc和cyclinDl的表达水平下降,表明Annexin a2通过与STAT3相互作用影响c-Myc和cyclinD1的表达水平调节乳腺癌细胞的增殖。3. Annexin a2基因沉默后MDA-MB-231细胞的迁移能力显著下降,体外侵袭能力明显减弱。Annexin a2表达水平下降后MMP-2及MMP-9的表达水平下降,表明Annexin a2通过与STAT3相互作用调节MMP-2、MMP-9的表达水平从而影响乳腺癌细胞侵袭能力。