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植物中非生物胁迫是一个非常复杂的过程,它包括高盐,低温,盐碱,干旱等环境胁迫。其中,盐碱胁迫对植物和农作物生长影响最大,PKSes通过翻译后磷酸化下游靶蛋白,或调节转录因子及胁迫应答基因,实现不同组织部位、细胞水平抗逆性的调控。本研究以盐碱(NaHCO350mM+NaCl70mM)胁迫处理的大豆(旱碱一号)为植物材料,首次从大豆中克隆了GmPKS4基因全长cDNA片段,并进行同源性比对；同时,利用Real-time PCR分析了在低温、干旱、ABA、盐碱及盐胁迫下的表达量。利用Gateway技术构建了PKS4基因植物超表达载体pCB35SR,R2-PKS4,并通过农杆菌介导法将其转入大豆(吉育72)。同时将PKS4基因启动子通过PCR技术进行克隆,并对其进行顺式作用元件的预测,最后,将PKS4基因启动子与GUS报告基因融合构建植物表达载体运用叶盘转化方法转化烟草(NC89)。本课题取得以下研究进展：1、通过将GenBank中发表的大豆PKS4基因序列设计引物,提取盐碱处理后的大豆叶片总RNA,反转录为cDNA后用于克隆大豆PKS4基因,结果获得全长为1317bp的全长cDNA序列。2、本试验采用Real-time PCR技术分析了在不同胁迫处理下根和叶中大豆PKS4基因的表达情况,结果显示：盐,盐碱,ABA,低温和PEG处理均可以诱导大豆PKS4基因的表达。其中,在盐及盐碱胁迫48小时后PKS4基因的表达量升高至对照的近90倍左右。3、将分离得到的大豆PKS4基因应用Gateway技术构建基因的植物表达载体pCB35SR1R2-PKS4,并通过农杆菌介导的外源基因转化技术转化至大豆(吉育72)中,并对转基因植物进行PCR检测,同时收集To代转基因大豆种子。4、通过PCR方法从大豆基因组中克隆PKS4基因启动子(全长1550bp),利用plantCARE启动子顺式作用元件预测软件进行分析。结果表明：GmPKS4基因启动子包含响应各种逆境胁迫的重要顺式作用元件。将该基因启动子与GUS基因融合,构建植物表达载体后通过农杆菌介导的外源基因转化技术转化烟草(NC89),并对转基因烟草进行PCR检测,收集To代转基因烟草种子。